橙花醇对白色念珠菌的细胞周期和细胞凋亡的影响(3)
细胞凋亡(apoptosis)又称程序性细胞死亡(programmed celldeath，PCD)，指多细胞有机体在生理条件下受到刺激后，为调控机体发育、文持内环境稳定，由基因编码调控，通过多种途径的信号传递，细胞形态和生化方面发生改变，从而导致细胞自发结束生命的过程[16]。是为了更好地适应环境而主动清除受、衰老或多余细胞，在多细胞生物正常生存中起重要作用[17]。
用流式细胞术检测细胞凋亡，采用的是AnnexinV/PI双染法[18]，细胞凋亡早期的一个特征性变化就是丧失细胞膜的不对称性，膜内磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)外翻，即从细胞膜内侧迁移至细胞膜表面，AnnexinV是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，其分子质量为35~36 ku，对PS 有高度亲和力，能与PS特异性结合[19]，从而可以将凋亡细胞标记出来。死细胞也会被结合，所以需要用一种核酸标记物，碘化丙啶(PI)，与DNA双螺旋的宽槽处结合，对坏死细胞进行强染色，而凋亡细胞染色较弱[20]。经过激光激发，区分细胞凋亡和细胞坏死，从而检测细胞凋亡。
关于橙花醇的抗菌机制方面的研究报道很少，大多为橙花醇的提取制备方面或仅停留在活性的初步研究方面。本研究主要通过定量分析，流式细胞术等方法，检测橙花醇对白色念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)，麦角固醇含量的变化以及研究橙花醇对白色念珠菌细胞周期和细胞凋亡的影响，进一步橙花醇抗真菌作用机制，为开发新的抗真菌药物提供理论依据。
1 材料与方法
1.1供试材料
1.1.1 原料
橙花醇：购买于上海晶纯生化科技股份有限公司。
白色念珠菌：由江苏师范大学生命科学学院微生物学实验室提供。
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