四季樱草的植物组织培养研究(2)
1.1简述植物组织培养
1.1.1植物组织培养简史
从19世纪开始，在世界范围内人们开始了对植物细胞培养的研究。起初人们只是假设，即植物的某一个部分能否培养出一个完整的植株，但那时并没有细胞全能性这个概念的提出，人们也不知道如何能使所谓的‘全能性’正确的表达出来。直到1839年，T.Schwann提出细胞在一个适宜的条件下具备发育成完整个体的能力，人们才得到启发，从而开始对其进行深入的研究[2]。然而若要证明植物细胞的全能性，必须利用植物细胞培育出完整的植株。1901年，Morgan首次提出细胞全能性的概念，引起了一场轩然大波，准确的说是引导了一场全新的革命。人们首次意识到，细胞是具有全能性的，只不过因为周围的环境和某种因素，细胞的某些功能被抑制，从而影响了全能性的表达。但是人们始终找不到能表达细胞全能性的正确材料。后来经过了许多人不懈的努力和尝试，但最终都以失败而告终。1965年，Vasil和Hildebrandt利用植物细胞培养出了完整的植株，从而真正意义上的证明了细胞的全能性。植物组织培养在短短几十年内取得了巨大的进展，在短短几十年间，已经有600多种植物能够应用组织培养的方法，并在许多交叉领域得到了新的应用和突破，其产生的价值难以估量[3]。但是，人们对植物组培技术的更深层次理解还未取得突破，相信在不久的将来，会有更加前瞻性的突破和进展。
1.1.2 植物组织培养的现代理念
植物组织培养，即如果在适宜的条件下，植物每个细胞都具有分化成完整个体的能力。狭义的植物组织培养指：在无菌条件下，植物的根、茎、叶等，在人工设定的环境下，进行离体培养，经历细胞的脱分化，使之成为愈伤组织，从而发育成完整植株，这个过程叫再分化[4],整个过程又称植物离体培养。
1.1.3植物组织培养的操作步骤
1.确定培养的植物和材料：植物组织培养技术广泛应用于多种植物中。但是植物的确定和材料的选择也起到很关键的作用，所以首先要确定培养哪种植物和使用哪种外植体。
2.确定培养基和激素种类：确定了培养植物和外植体的种类，接下里要根据植物的生理学特性和所需培育的方向来确定合适的培养基和激素种类，不同的植物所用的培养基和激素不尽相同，所以要先确定培养基和激素的种类。
3.培养基的配制和灭菌：根据自己的需要来配制培养基并灭菌。
4.外植体的选取与消毒：选取实验所需的外植体种类并消毒。
5.无菌接种：在保证无菌的条件下，将消毒之后的外植体放入已灭菌的含有琼脂、蔗糖、无机盐、激素等各种营养物的MS培养基上。
6.植株诱导：在MS培养基的植物激素作用下，外植体通过侧芽增殖、不定芽的形成和胚状体的形成这三种方式开始增殖。
7.生根：若要长成完整的植株，则必须令外植体生根，再转移到相对应的环境中培养，才可形成完整的植株。生根一般有两种方法：一种是在含有特定激素的培养基上诱导生根。另一种则是先用高浓度的生长素浸泡，然后再转接到普通的MS培养基中生根。
8.移栽：当所培育的植株生根以后，将所培育出的植株进行移栽。移栽后，保持温度恒定、高湿度以及避免阳光直射，经过一段时间的培养后，再移植到土壤中[5]。
1.1.4植物组织培养实验中的问题及对策
植物组织培养中主要的问题大概分外植体的污染、植物体褐化、植物体玻璃化。针对以上几类问题常见的解决方法是：
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