水稻卷叶突变体的特性分析与基因定位(3)
1 材料与方法
1．1 材料
野生型水稻日本晴(Oryza sativa L. ssp. japonica var. Nipponbare)。
从Co60诱变的日本晴突变体库中筛选到的一个水稻卷叶突变体rl1。
日本晴水稻卷叶突变体rl1与籼稻品种窄叶青8号的杂交F2群体212株。
1．2 实验方法
1．2．1 突变体农艺性状的测定
选取同时于田间种植的成熟的突变体和野生型（WT）水稻各5株，分别测量其株高、分蘖数、穗长、每穗粒数、千粒重，并计算结实率和单株产量。
1．2．2 突变体泡状细胞的结构分析
分别选取抽穗期（花后20天）的突变体和野生型水稻第4叶的新鲜叶片，首先使用4% 低熔点琼脂固定，之后使用DTK100振动切片机横切为60 μm厚的薄片。之后将切片浸泡在浓度为95% （体积比）的酒精中1h，接着将切片浸泡入浓度为0.2% 的对甲苯胺溶液中浸泡10min染色。染色结束后，再将切片浸入95% 的酒精中2min，后用水冲洗，放置于Olympus BX53光学显微镜下观察，使用显微镜自带的Olympus DP73数码相机拍摄显微图像。最后使用Image J软件测量泡状细胞的面积。[10]