琼脂糖凝胶/PCR产物纯化试剂盒
2.5 实验方法
2.5.1 土壤菌悬液的制备
将从采样地三个区域取回的三袋土壤样品混匀,用孔径为2 mm×0.25 mm的钢筛筛去大块的土壤团块,重复筛选三次,得到细小的土壤颗粒,准确称取1g土壤样品,置于灭菌的99ml的生理盐水中,摇床摇晃8小时,使土壤微生物(主要为细菌)充分分散,此时为浓度为10-2的菌悬液,静置3 h使土壤沉淀充分。在无菌超净台内,用移液枪吸取0.5ml的10-2的菌悬液,转移到装有已灭菌的4.5ml生理盐水的试管内,此时为浓度为10-3的菌悬液。同样步骤稀释以上菌液,配制一系列浓度梯度的菌悬液,浓度依次为10-4、10-5、10-6、10-7、10-8。