尽管苔藓植物大多数生长在森林地表面或者有机物分解的基质上，但其从来不被细菌或真菌感染，其生长基本不受到影响。苔藓植物具有不易腐烂, 不易霉变, 不被昆虫和一些动物所侵害等特点。存放在标本馆里的高等植物标本易受寄生微生物(细菌、真菌等)的侵蚀,需经过特别处理，但苔藓植物标本只需简单处理，即可长期存放。所有这些都表明苔藓中存在着一些活性物质作为自身保护剂，即通过合成具有抗微生物活性的次级代谢产物来保护自身，抵抗微生物的侵害[6-8].

黄酮作为重要的次生代谢化合物，对了解植物系统演化关系及分类具有重要的意义。在早期陆生植物演化过程中，这类化合物在结构的复杂性和多样性上都有了明显的变化。这些改变不仅在植物形态学及生殖发育领域有着至关重要的作用，而且是植物抵御捕食和灾害的保护屏障。在一些研究中，发现

本次研究以24种体型较大苔藓植物与5种常见细菌作为研究对象，筛选出抑菌能力较高的苔藓种类，并探讨苔藓植物黄酮类化合物含量及其与抑菌性能力之间的关系，为资源开发应用、探索先导化合物提供依据。

1. 材料与方法

1.1试验材料

1.1.1苔藓样本

实验以拟宽叶泥炭藓(Sphagnum platyphyllojdes)等24种苔藓植物作为研究对象（表1）。样本均采自额尔古纳自然保护区。

1.1.2供试菌株

实验以大肠杆菌(Escherichia coli)；枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)；蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)；荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)；小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)等5种常见细菌作为被试对象。菌种由本校微生物实验室及上海复祥生物有限公司共同提供。源^自·优尔|文\论]文'网[www.youerw.com

1.1.3主要设备仪器

恒温摇床，高速冷冻离心机，恒温水浴锅，冰箱，高压蒸汽灭菌锅，烘箱，超净工作台，移液器，针式过滤器，37℃恒温培养箱，超声波振荡器，紫外可见分光光度计，解剖镜，Leica数码显微镜。

1.2试验方法

1.2.1苔藓植物抑菌性测定

1.2.1.1苔藓植物提取液的制备

苔藓样本洗净，于80℃烘箱内烘干。用液氮研磨至粉碎，取1g粉末和10mL95%乙醇于锥形瓶中，密封置于恒温摇床浸泡过夜。离心得上层清液，置于4℃冰箱保存，备用。

1.2.1.2细菌培养基的制备

采用LB液体培养基和LB固体培养基。

1.2.1.3菌悬液的制备

取备用菌种，用接种环各取菌苔少许接种至LB固体培养基斜面上，在37℃恒温箱中活化24h。然后将活化的菌株接一环到4ml液体培养基中，摇床培养8h左右，即制成菌悬液。

1.2.1.4滤纸片平板扩散法测定抑菌作用

在超净工作台上倒平板，待凝。稀释菌悬液浓度，取0.2mL稀释菌液于固体培养基上，涂布均匀。取无菌滤纸片每次等量蘸取提取液（95%乙醇），贴于平板合适位置，每种菌做三个重复。将制好的平板倒置于37℃恒温箱中培养18h左右。培养完毕后，用游标卡尺测量平板上的抑菌圈直径，并取三组实验结果的平均值。

1.2.2苔藓总黄酮含量测定

1.2.2.1苔藓样本黄酮的提取（超声波提取法）

称取苔藓样品粉末1.00g于100ml锥形瓶中，加入25ml 60%乙醇、25ml单蒸水，于50℃水浴锅内水浴2h，使黄酮充分溶解于溶液中。冷却后，超声提取20min，并对其进行抽滤，收集含有黄酮的滤液，滤渣置于锥形瓶，加入25ml 60%乙醇，再在50℃水浴锅中水浴2h，重复以上超声提取和抽滤过程，得滤液，将所得的两次滤液合并，弃滤渣。减压蒸馏回收乙醇至滤液仅剩5ml为止，置于100ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。