摘要：蜜蜂传粉可以将转基因油菜的外源基因转移到其它近缘植物，进而带来一系列的生态风险。本实验首次以我国特有的中华蜜蜂和自主培育的转基因油菜作为实验材料，通过油菜花期田间蜜蜂授粉实验, 研究蜜蜂传粉对转基因油菜和普通油菜间基因流频率的影响。结果表明，在挂账隔离且人工放养蜜蜂的授粉条件下，转基因油菜与普通油菜间的基因流频率最高，达4.0984%；在挂账隔离但无蜜蜂授粉条件下的基因流频率仅为1.3611%，而在自然授粉条件下基因流频率则为2.3772%。不同授粉方式下转基因油菜的基因流频率差异达极显著水平，蜜蜂觅食是影响基因流差异的重要因素。本研究结果直接为我国转基因油菜的生态风险评价及其安全管理提供了科学依据。52770

毕业论文关键词：转基因油菜，中华蜜蜂，基因流

Abstract: Pollination by bees can transfer exogenous genes of transgenic canola plants to other kindred plants and therefore result in a series of ecological risks. This research, by innovatively regarding China-specific apis cerana and self-cultured transgenic canola plants as experimental materials and conducting bee pollination experiments in fields of canola plants, has studied the influence of bee pollination on gene flow frequency between transgenic canola plants and common canola plants. The result indicates that the gene flow frequency reaches its highest level  (4.0986%)under the conditions of separation and pollination by artificially restocked bees; the gene flow frequency is only 1.3611% under conditions of separation but no bee pollination; the frequency is 2.3772% under the condition of natural pollination. Under different pollination ways, the gene flow frequency variance of canola plants reaches a very significant level and the foraging of bees is an important factor that is influencing gene flow variance. The result of this research has provided a direct scientific basis for evaluating and safely managing ecological risks of transgenic canola plants in China.

Keywords: transgenic canola plant, bees, gene flow

目 录

1 前言 4

1.1  转基因油菜的发展与应用 4

1.2  转基因油菜的生态风险 5

2  材料和方法 6

2.1  供试材料 6

2.2  试验地点 6

2.3  实验方法 7

3  实验结果 9

3.1  不同授粉条件下转基因油菜与油菜间的基因流频率差异 9

3.2  抗除草剂植株Bar基因的分子检测 10

4  讨论 11

参考文献 14

致 谢: 16

1 前言

1.1  转基因油菜的发展与应用

油菜（Brassica napus）属于双子叶植物，十字花科，芸苔属，主要分布于中国，美国以及加拿大。油菜是最重要的油料作物之一，对于油菜的改良一直是育种家们长期努力的目标。多年以来，许多育种工作者都想要通过传统的育种手段来获得油菜的良种，不过进展却十分的缓慢。随着基因工程技术的发展，许多科研者越来越倾向于利用基因工程的手段去改良油菜的产量、品质和抗逆性。

1983年，全球第一例转基因植物即一种含有抗生素药类抗体的烟草在美国被成功的培植，当时就有人开始惊叹：人类开始有一双能够创造新生物的上帝之手了，“转基因”一词渐渐成为人们关注的新焦点。自1985年Holbrook等[1]报道了农杆菌可以侵染甘蓝型油菜并形成冠瘿瘤以来，转基因油菜的研究有了长足的发展[2，3，4]。在1986年时Mathew等第一个把NPT-Ⅱ基因通过农杆菌介导法转入芥菜型油菜中以来，转基因油菜的研究与开发在世界范围内取得了举世瞩目的进展。1997年中国科学院微生物研究所报道了用油菜下胚轴与子叶作为转化受体，建立油菜高效转化系。并且以此为基础，将抗除草剂溴苯腈基因bxn导入到油菜中，获得抗溴苯腈转基因油菜[5]。在1998年中国科学院微生物研究所又报道了从细菌Bacillus amyloliquefaciens染色体DNA里克隆barnase抑制剂barstar的基因，并且构建带有TA-29基因5′调控区(-1300—+3)与barstar基因编码区、CaMV35S启动子与除草剂抗性基因bar的两个表达框架的植物表达质粒pBBS。将“双低”油菜“5-4”的子叶柄做为受体，通过利用农杆菌介导的遗传转化，获得含有10mg/L卡那霉素和20mg/L PPT的筛选培养基上再生的转基因植株[6]。由于我国的食用油有一半以上来自油菜，所以油菜育种特别是优质油菜育种开始引起我国政府和科研工作者们的高度重视，在最近几年里，转基因油菜的研究也未曾中断过。