1.1.5可溶性糖
可溶性糖在植物体内主要是指能溶于水或是乙醇的单糖和寡聚糖。可溶性糖对植物细胞具有渗透调节及保护膜结构稳定的作用,植物能够在体内主动积累可溶性糖以降低细胞渗透势,适应外界逆境的胁迫[12],因此测定湿度对萌发过程中玉米种子可溶性糖含量的影响,有利于研究玉米种子的抗逆境能力,以期提高种子对逆境抵抗能力。
1.1.6 丙二醛源]自=优尔^`论\文"网·www.youerw.com/
MDA是膜脂过氧化的最终分解产物,体现植物细胞膜质过氧化程度,因此,它的含量可以作为反映植物遭受逆境胁迫伤害的程度的指标。那么,丙二醛含量越高,说明植物的细胞膜质过氧化程度越高,受到的逆境伤害越严重[8]。MDA是膜脂过氧化最重要的产物之一,它的存在能够加剧膜的损伤程度。因此MDA含量作为研究植物衰老生理和抗性生理中的一个常用指标,可通过MDA了解膜脂过氧化的程度,以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。此次将MDA作为代谢物的一个测量指标,以便来探究在萌发过程中玉米种子遭受逆境胁迫伤害的程度及膜系统受损程度。
1.2湿度对萌发过程中玉米种子影响的研究背景及意义
近年来,由于全球水资源的日益匮乏和气候变暖现象越来越严重,在西北地区,气候变的异常复杂,干旱的气候现象已经变得十分普遍,给玉米生产带来严重影响。此时,对玉米种子的贮藏就变得非常重要。而在当今世界,各国保存植物种质普遍采用现代化低温种子库的方式。但在低温种子库的不断发展中,许多问题也随之而来。比如耗资巨大、常年运转费用昂贵、电源要有保障、技术要求非常高等,这对于经济不发达的国家、地区和单位来说,是一项非常沉重的经济负担。因此,人们迫切需要寻找一种简便易行的种子种质保存新技术,既能够节约资源,又能够最大限度地延长种子寿命[9]。在此背景下,探究环境的不同湿度对萌发过程中玉米种子代谢物的各组分含量影响,有助于我们了解种子的萌发机理,也利于探索种子密封贮藏在常温条件下保存种质的方法,达到降低电耗的节能效果。
2 实验材料与方法
2.1实验材料
(1)、无玉米种子,培养皿,纱布,研钵,量筒,烧杯,容量瓶,离心管,移液枪,试管及试管架,秒表,电子天平,离心机,分光光度计,紫外分光光度计,电磁炉与蒸锅,镊子,剪刀等。
(2)、0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.8); 0.2mol/L 磷酸缓冲液(pH6.0); 0.15mol/L磷酸缓冲液(pH7.0); 130mmol/L 甲硫氨酸(Met)溶液; 750μmol/L氮蓝四唑溶液存; 100μmol/LEDTA-Na2溶液; 20μmol/L 核黄素溶液; 0.05mol/L愈创木酚溶液; 0.2mol/LH2O2溶液; 5%三氯乙酸(TCA); 0.6 %硫代巴比妥酸(TBA)溶液; 考马斯亮蓝G-250溶液; 100ug/ml标准蛋白质溶液等
2.2实验方法
2.2.1玉米的采集
选用实验室专门购买的玉米种子材料,进行培养实验。
2.2.2玉米材料的处理
选取一定的玉米种子,30粒左右,平摊在底部铺有两层纱布的培养皿中,玉米种子上再覆盖上一层纱布。设置高湿度组与低湿度组,每组均有三个重复,放置在控温箱中,根据实验要求控制每组一定的湿度与温度,每天取样测其生理指标,直到种子萌发为止,一般培养三天种子即萌发。温度均控制在18摄氏度,湿度的设置为高湿度组:100%RH、90%RH、80%RH, 而低湿度组:70%RH、60%RH、50%RH。两组的湿度差异较大,这样测定的结果变化趋势就会明显的显示出来。