试剂配制：文献综述

1.红细胞稀释液（Hayem稀释液）

  NaCl   （维持渗透压）                                      0.5g

  Na2SO4  (使溶液比重增加，红细胞均匀分布，不易下沉         2.5g

  HgCl2   （固定红细胞并防腐）                              0.25g

  蒸馏水                                                加至100ml

2.白细胞稀释液

   冰醋酸            （破坏红细胞）                          2.0ml

   1%龙胆紫或1%美蓝（染白细胞核呈淡蓝色，以便识别）         1ml      

蒸馏水                                                加至100ml                                                 

3.血小板稀释液（许汝和氏含尿素稀释液）

   尿素      （维持渗透压）                                10~13g

柠檬酸钠   （防止血小板凝集）                             0.5g

  40%甲醛溶液（防腐）                                      0.1ml

  蒸馏水                                              加至100ml

（注意：先将尿素、柠檬酸钠溶于蒸馏水中，然后再加甲醛溶液。）

2.2.2 实验步骤

（1）采血与稀释

   用5ml移液管吸取3.98ml红细胞稀释液并放入1号小试管中备用，用1ml移液管吸取0.38ml白细胞稀释液并放于2号小试管中备用，再用2ml移液管吸取2ml血小板稀释液并放入3号小试管中备用。

   实验采用心脏心脏穿刺采血法，将棉球蘸取适量乙醚用于麻醉小鼠，待小鼠麻醉完成， 用5.0 mL注射器，针头紧贴剑突下，以角度25°～30°斜行向上进针刺入皮下，边进针边缓缓回抽针管，针尖穿过横膈膜继续斜行刺入2.5～3.0cm，一旦感到针管有轻微搏动，表明针尖已进入心脏内，血液借心脏跳动的力量涌入注射器内[8]，然后用一次性毛细血管分别三次准确吸取血液20µl、20µl和10µl，擦净管外沾染之血，依次分别将滴管插入放有上述盛有稀释液的试管底部，轻轻吹出血液，并用上清液清洗毛细吸血管2~3次，轻轻摇动试管1~2min，使血液与稀释液充分混匀。

（2）血细胞计数板

  计数板是一块刻有一定面积刻度的长方形厚玻璃板，将盖玻片（与计数板同时配套购置）放入计数板中央，用洁净玻璃棒蘸取少量已稀释混匀后的血细胞悬浮液，于盖玻片边缘一次性滴入计数室内，使之灌满，静置2~3min后，待细胞下沉后进行计数。计数血小板的血细胞悬液应静置15min。滴入计数室内的细胞悬液不能过多或过少。在计数红细胞、白细胞和血小板时可各使用一个计数室。来.自/优尔·论|文-网·www.youerw.com/