标准曲线的制作方法：

取7支10mL具塞刻度试管编号，按表3分别加入浓度为l mg／mL的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸配成不同葡萄糖含量的反应液。

表3 还原糖标准曲线的制作

管号 1mg/mL葡萄糖标准液(mL) 蒸馏水(mL) DNS(mL) 葡萄糖含量(mg)

0 0 2 1.5 0

1 0.2 1.8 1.5 0.2

2 0.4 1.6 1.5 0.4

3 0.6 1.4 1.5 0.6

4 0.8 1.2 1.5 0.8

5 1.0 1.0 1.5 1.0

6 1.2 0.8 1.5 1.2

将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5min，取出后冷却至室温，用蒸馏水定容至10mL，加塞后颠倒混匀。在分光光度计上进行比色，调波长540nm，用0号管调零，测出l~6号管的吸光度值。以吸光值为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，绘制标准曲线。

计算结果均在标准曲线中查出相应的还原糖含量，计算样品中还原糖的百分含量：还原糖含量(%)=还原糖毫克数×(提取液体积／显色时所用体积) ×100％/ (样品质量×1000) 。

1.3.3 蛋白质含量的测定

采用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量[10]。吸取样品提取液1.0mL，放入试管在中，加入5mL考马斯亮蓝G-250溶液，充分混合，放置5min后在595nm下比色，记录吸光值，通过标准曲线查得蛋白质含量。来!自~优尔论-文|网www.youerw.com

标准曲线（蛋白质含量为0~100μg/mL）的制作：

牛血清蛋白溶液：浓度为100μg/mL，按照表4配置：

表4蛋白质标准曲线的制作

管号 1 2 3 4 5 6

蛋白质标准液（mL） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

蒸馏水（mL） 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0

蛋白质含量（μg） 0 20 40 60 80 100

考马斯亮蓝液（mL） 5 5 5