1.3  本文研究目的和研究内容

1.3.1研究目的

在畜牧业中，牲畜生长对饲料的营养要求较高，稻草秸秆直接作为饲料，其中的粗纤维较高，蛋白质也不易消化，牲畜食用后会增加肠胃负担，引起腹泻等。且其中不凡会携带有致病菌，其对牲畜的身体健康状况和生产性能都会产生影响。因而也促进了人们对新的发酵制剂的研制开发。但目前我国的发酵饲料生产还处于初期阶段，其中存在很多问题，例如：没有统一的生产标准，且生产技术也很不成熟，设备落后，生产过程中不卫生等。并且，发酵菌的来源较多，期间的菌种发酵过程不统一使得产品质量较低下。

农业和畜牧业的迅速发展使得寻找农业废料处理方法和解决人畜争粮矛盾成为了刻不容缓的课题。科学的、高效的利用组合发酵菌株将农业废料中的营养成分分解变为利于牲畜消化的成分是目前所面临的巨大挑战。随着发酵技术的发展，其在发酵饲料中的应用也越来越广泛，在粗饲料中利用微生物发酵，将其营养物质释放以便于牲畜消化。但市面上能够采购到的农用饲料发酵剂采用不同种类微生物，而其间的差异性及其间的相互作用不可忽视，菌种的毒性存在与否等都不知晓，而现阶段国内外对于不同菌的共生特性等因素的研究鲜有报道，所以本研究旨在筛选出用于发酵饲料的优良菌种，并通过对比复合与单一菌株发酵效果明确最优菌种组合。

1.3.2  研究内容

针对上述存在的问题，本文从青储饲料、自然发酵秸秆、发酵饲料等原料中，分离筛选优势乳酸菌、芽孢杆菌和酵母菌；以稻草秸秆和菜籽粕为发酵基质，通过对比单一和复合菌种的发酵性能，确定最优的菌种组合，筛选优良的发酵菌种。具体研究内容如下：

（1）采用YPD、MRS和LB鉴别培养基对发酵饲料，青储饲料中的酵母菌、乳酸菌和芽孢杆菌优势菌株进行筛选、鉴定。

（2）以稻草秸秆、菜籽粕等作为发酵基质，进行单菌种和多菌种联合发酵，通过感官指标、活性成分、活菌数等进行测定，以确定最优。

2  材料和方法

2.1  试验材料

2.1.1  试验样品

材料：稻草、玉米粉、菜籽粕、豆粕等采购于上海奉贤周边，保存于干燥阴凉处。

2.1.2  试验试剂

表2.1  实验试剂

序号 名称 厂家

1 MRS琼脂固体培养基 青岛高科园海博生物技术有限公司

2 羟甲基纤维素钠 上海精析化工科技有限公司

3 无水葡萄糖 国药集团化学试剂有限公司

4 MRS肉汤培养基 Merck KGaA

1）1%羟甲基纤维素钠溶液：将CMC-Na粉末在121°C干燥箱中烘干20min后，直至恒重，准确称取羟甲基纤维素钠1g，在50°C水浴下不断搅拌使之溶于100ml蒸馏水中。

2）1mg/ml葡萄糖溶液：将葡萄糖粉末在121°C干燥箱中烘干20min后，称取0.05g葡萄糖溶于蒸馏水中，并定容到50ml容量瓶中。来,自|优;尔`论^文/网www.youerw.com

3）1%酪蛋白溶液：将酪蛋白粉末在121°C干燥箱中烘干20min后，称取1g酪蛋白，滴加少量0.5mol/LNaOH溶液湿润调节pH值后，加入pH7.5磷酸缓冲溶液，在沸水浴中搅拌，使其溶解，冷却后定容到100ml容量瓶中。

4）pH7.5磷酸缓冲溶液：准确称取磷酸氢二钠6.02g，磷酸二氢钠0.5g，用蒸馏水溶解并定容至1L容量瓶中。