参考文献 11

致谢 13

图清单

图序号 图名称 页码

图3-1 菌株KLBMP 5180在ISP 2培养基上培养7天的扫描电镜照片 9

图3-2 双向薄层板分离菌株KLBMP 5180极性类脂 12

图3-3 基于16S rRNA基因序列构建的菌株KLBMP 5180的系统发育树 13

图3-4 KLBMP 5180的G+C HPLC 分析结果 14

表清单

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表3-1 菌株KLBMP 5180的培养特征 5

表3-2 菌株KLBMP 5180与其最相近的种之间的生理生化特征比较 6

1绪论

土地盐碱化对植物的胁迫是威胁全球农业健康发展的主要因素之一，增强农作物的抗盐碱能力，一直是我国农业持续和高效发展的重要课题[1]。植物内生菌是当前国际上微生物学的研究热点之一，它们存在于植物内部，在增强植物抗病虫害、抗盐碱、干旱等生物域非生物胁迫方面具有重要作用[1]。在我国，针对药用植物内生菌的研究已经有二十多年的历史，很多研究结果表明，分离自植物体内的内生菌有些能够产生一些特殊生理活性的物质[2]。目前已经从上百种植物中发现了内生菌的存在，包括真菌、细菌和放线菌[3-5]。相对于内生真菌的研究，内生细菌尤其是内生放线菌在植物中的数量要少一些。据不完全统计，已从小麦、棉花、水稻、番茄、马铃薯等近30种植物中分离出了近60个属的内生细菌[6]。目前国际上已被描述的放线菌约有 200多个属，4000多个种[7]。

植物内生放线菌是一类重要的且有很大开发潜力的微生物资源[8]，能够产生抗生素以及酶等代谢产物。可以使用化学分类的方法研究放线菌的化学特性，并通过这些不同的特性对放线菌进行分类和鉴定，磷酸类脂、脂肪酸和甲基萘醌等化学组分都能够作为放线菌的分类指标[9]。《佰杰氏细菌鉴定手册》显示，研究发现的放线菌属数量在不断的增长，相比较之前增加了近两倍[10]。《伯杰氏系统细菌学手册》中，G+C含量较高的革兰氏阳性细菌也被确定为放线菌门[11]。研究发现，植物内生放线菌有很大的开发利用潜力并且在植物病害的防治中发挥重要的作用[12]。

菌株KLBMP 5180属于放线菌门、节杆菌属。节杆菌属菌株在自然界中广泛分布，也是土壤中的重要细菌类群，具有降解污染物、抗重金属等多种生物活性[13]。基因组学研究发现，节杆菌中含有广泛的有活性的蛋白基因[14,15]，一些与胁迫应激反应有关的基因可以使节杆菌适应多种生存环境[16]。随着科技的飞速发展，用于基因组测序的成本不断降低，所需的时间也大幅缩短。目前，多株节杆菌已经完成了全基因组测序[14,15]。通过这些基因组序列，可以更加全面的了解节杆菌的环境适应性分子机制[16] 。论文网

菌株KLBMP 5180是从中华补血草中分离得到的具有ACC脱氨酶活性的植物内生菌，对补血草有显著的促生作用。本实验采用多相分类技术对菌株KLBMP 5180进行研究，该技术是细菌分类学中重要的指标，用于描述多种分类单元[17]，它综合了基因型和系统发育等多方面的数据，使分类方法更加客观合理[18]，从而确定菌株具体的分类地位，以期发现新的物种。新物种更有可能含