2.2.9 不同浓度样品对RAW264.7细胞释放NO和PGE2的影响 13

2.2.10 数据分析 13

3 实验结果 13

3.1 多糖的红外透射光谱 13

3.2 气相色谱分析 14

3.3  WBR刺激细胞建立细胞模型 14

3.4 不同浓度WBR对RAW264.7细胞毒性及释放细胞炎症因子的影响 15

3.4.1 Griess法检测细胞液NO含量 15

3.4.2 ELISA法检测细胞液PGE2含量 16

3.4.3 ELISA法检测细胞液TNF-a含量 17

结论 18

参考文献 19

致 谢 21

1 引言

1.1 炎症的研究进展

1.1.1 炎症

炎症是一种常见的病理过程，可以在机体各部位的组织和各器官形成。急性炎症随时常伴有发热、白细胞增多等全身反应。这方面变化的产生实质上是机体与致炎因子进行全抗争的规律反映。这种分歧抗争穿过在炎症过程的始终。致炎因子作用于机体后，一方面引发组装细胞的损坏，使片面组装细胞显现变性、坏死。论文网

1.1.2 参与炎症反应细胞

巨噬细胞是一种粘性细胞，一种非常重要的免疫效应细胞，具有免疫防御、监视、调节等多种免疫功能，可以高效的发生变形运动,吞噬外来抗原，通过吞噬微生物和分泌多种细胞因子等功能从而来调控机体的炎症免疫应答，在机体的免疫系统中起尤为重要的作用。巨噬细胞在固有免疫和适应性免疫反应中具有重要的作用，它可将加工后的抗原提呈给相应的T细胞，活化后的T细胞通过细胞膜上的分子或分泌的细胞介素进一步活化巨噬细胞[1]。巨噬细胞的吞噬作用主要有两大类，它们是特异性和非特异性吞噬。活化的巨噬细胞吞噬杀伤能力大大加强,并释放各种活性物质，因此巨噬细胞是主要的炎性反应调节细胞。同时借用辅助性T细胞(Th)的概念，从激活方式上将巨噬细胞分为经典激活的巨噬细胞(classically activated macrophages，CAMs或M1)和非经典激活的巨噬细胞(alternatively activated macrophages,AAMs或M2)两大类。M1型巨噬细胞产生促炎症细胞因子[2]。巨噬细胞是体内最为活跃的免疫细胞之一，能主动发生变形运动，吞噬颗粒性外来抗原或分泌细胞因子，并产生多种生物活性的物质以发挥其强大的免疫调节作用。

1.1.3 诱导炎症的细胞因子

革兰氏阴性菌外膜的脂多糖（Lippolysaccharide，LPS）是诱发慢性炎症及感染性疾病的重要因素，产生炎症反应的细胞因子主要包括：抗肿瘤坏死因子、白介素等。根据持续时间不同分为急性和慢性。急性炎症以发红、肿胀、疼痛等为主要征候，即以血管系统的反应为主所构成的炎症。炎症是动物机体对各种致炎因子及促炎因子或外界对机体的损伤及刺激所发生的以防御反应为主的应答反应，以局部组织的病变为主要表现。并可见有巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞的浸润和成纤维细胞的增生。炎症是一种极其常见的基本病理过程，往往伴随着疾病的发生，且会促进疾病的发展，严重时会产生恶性肿瘤等。文献综述

随着生物化学及分子生物学等相关学科的发展，近几年研究发现，LPS诱导的炎症信号与TLRs家族等有关，正是TLRs等激活的细胞信号级联反应控制着各种效应基因表达的转录因子，在哺乳动物的宿主防御中起重要作用。关于LPS内毒素(ET)是一种革兰阴性细菌细胞壁的组成成分，只有在细菌死亡或繁殖时，才释放到细胞外，发挥各种效应。内毒素的化学本质为脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)，当机体受到革兰阴性细菌感染时，LPS作用于细胞膜受体，导致全身发生炎症反应，由此引起中毒性休克、全身炎症反应综合征(SIRS)和多器官功能障碍综合征(MODS)[3]。LPS是革兰阴性细菌的致病因子，可导致宿主失控性表达细胞因子，机体中LPS也表现出显著的有益作用，如增强机体特异性抵抗力、抗肿瘤作用等[4]。