地球上的所有动物都有一种叫“生物钟”的生理机制,也就是从白天到夜晚的一个24小时循环节律,比如一个光-暗的周期,与地球自转一次吻合。最近几年来,时间生物学认为,生物体的生命会随着昼夜交替、四时更迭的周期性进行运动,从而揭露出生理活动的周期性节律。我们知道,睡眠对于大脑健康是极为重要的。如果睡眠的时间不足、质量不高或者睡眠时间过长,那么都会对大脑产生不良的影响,大脑的疲劳就难以恢复,严重的可能影响大脑的功能。生物钟是受大脑的下丘脑“视交叉上核”(简称SCN)控制的,和所有的哺乳动物一样,人类大脑中SCN所在的那片区域也正处在口腔上腭上方,我们有昼夜节律的睡眠,清醒和饮食行为都归因于生物钟作用。在维持方法生物钟起着重要作用,是指人们在作某一事时,能够使人一直做下去的力量。比如上班,就是生物钟这一功能的结果,又比如人的眼睛对某一件事物进行观察时,能够聚精会神地看,也是它的结果,还有就是当注意力从视觉转移到听觉时,也是生物钟作用的结果,但是,你要完成一件事情,就必须用生物钟的该功能才能听完,否则你就会出现记忆不集中的状态。这种维持可以是连续的也可以是断续的维持。在应用方面,生物钟基因的研究有助于对遗传性疾病的了解。钟基因突变可使机体昼夜周期延长或缩短,从而造成机体与环境失同步,导致精神性疾患,如神经分裂症、双极症、抑郁症和季节性情绪障碍等[7]。生物钟通过像时钟一样循环的振荡工作,它的工作节律是不会受到其他因素影响的,所以认为其周期振荡节奏是内生的或在不同器官内独立进行。生物钟的存在有极重要的生物学意义,鉴于爪蟾作为发育生物学动物模型的诸多优势,运用爪蟾胚胎进行生物钟对其行为及神经环路影响的研究将具有较大的潜力,通过观察其行为学的变化,可通过使用不同的光照时间处理发育过程中的蝌蚪,检测蝌蚪对不同光照时间刺激的逃避反应情况,观察改变光照时间是否调节行为学变化和用不同光照时间处理蝌蚪,和正常光照时间的蝌蚪进行对比的研究。通过这些检测结果,研究生物钟对爪蟾行为学[8]的影响,为今后建立一套检测生物钟对脊椎动物影响的科学方法奠定良好基础。

本课题主要是研究内容是探讨生物钟对蝌蚪行为的调控作用,并研究生物钟调控行为变化的可能生物学机制。主要从以下几个方面去研究:使用不同的光照时间处理发育过程中的蝌蚪,检测蝌蚪对不同光照时间刺激的逃避反应情况,观察改变光照时间是否调节行为学变化。分析不同光照时间对行为学的影响关系,研究生物钟变化对蝌蚪行为学变化的可能机制。

2 生物钟对蝌蚪生长发育研究方法的建立

2。1  主要材料

2。1。1主要试剂

10X Steinberg’s Stock:119g Hepes,34g Nacl,2。06g magnesium sulfate,o。8g calcium nitrate,0。5g potassium chloride,1liter water pH7。5

绒促性素(HCG):宁波第二激素厂

2。1。2 主要仪器

爪蟾视觉逃避行为密闭装置(自组装)

恒温培养箱:福意联,北京福意电器有限公司 暗盒

2。1。3 非洲爪蟾介绍

非洲爪蟾,属于比较原始的蛙类,学名:Xenopus laevis,它缘何得名?这和它典型的外形特征是分不开的。“Xenopus” 是拉丁语,意思为“特殊的足”,非洲爪蟾后足发达,有五趾,有发达的蹼,其中内侧3趾末端有角质化的爪,故而得名爪蟾;“laevis”意思为“光滑的”,是指其皮肤光滑。加上非洲爪蟾广泛分布于非洲撒哈拉大沙漠以南地区,故而称为非洲爪蟾,俗名光滑爪蟾、非洲滑蟾等。 直到20世纪50年代,它也逐渐成为发育生物学研究的主角。 非洲爪蟾是目前最常用的两种模式低等脊椎动物。以非洲爪蟾为代表物种的两栖类动物因易于实验室养殖、可诱导产卵、胚胎体外发育、产卵量大(一次几千枚)、胚胎体积大(直径约1。2 mm)而易于显微操作等优点,仍然被认为是发育生物学研究的几大模式生物之一,为脊椎动物发育生物学研究,特别是早期胚胎发育研究做出了非常重要的贡献。文献综述

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