2。2 主要材料与方法
2。2。1 材料准备
本次研究主要运用非洲爪蟾胚胎作为模式动物,成年非洲爪蟾购自美国NASCO公司,雌雄成年爪蟾饲养在去氯自来水的爪蟾养殖系统内,水温大约在22℃左右,明暗光照周期为12h:12h,每周喂1次猪心和1次合成饲料。首先,选取可以配对的非洲爪蟾,通过对一雄一雌的非洲爪蟾进行配对,雌蛙注射600 IU,雄蛙注射300 IU,诱导交配,雌性爪蟾注射1000单位HCG,雄性爪蟾注射500单位HCG,放在一个水箱内进行配对。受精的卵母细胞孵化变为34期后开始选择活动状态良好的蝌蚪100只作为实验材料备用。
2。2。2 选取实验材料
在34期后开始选取体表无损,活动状态良好的蝌蚪100只,培养至37期后开始检测其活动状态,将一只蝌蚪放于行为学检测装置中,使用free swimming检测蝌蚪在一分钟自由泳中游动的路程和速度,每一只蝌蚪都进行自由泳检测,选取游动路程长,速度中等的,并且路程基本一致的蝌蚪进行实验。来*自~优|尔^论:文+网www.youerw.com +QQ752018766*
2。2。3 不同时间光刺激对蝌蚪的培养
随机分成3组,设置实验组和对照组。其中一组对照组,其余两组为实验组,各组24只蝌蚪,其中对照组为12h光照和12h黑暗,实验组一为20h光照和4h黑暗。实验二为4h光照和20h黑暗。实验用挑选的体表无损、活力良好蝌蚪个体,放于20摄氏度的培养箱中培养,实验组放进暗盒中,在规定时间里进行互换以达到实验要求,从34期连续培养至47期后开始每天测行为学,以6只为一组分别放于行为学仪器中测one dot分别观察和记录每组蝌蚪对不同光照时间刺激的逃避反应情况。观察蝌蚪行为学,以探讨不同光照对蝌蚪生长发育的影响。