白芨有效成分的提取及功效评价(4)
(2) 离子交换树脂
将阴离子交换树脂用碱进行预处理,其可以选择性的吸附还原糖,部分吸附蔗糖,用NaCl溶液进行洗脱,常用的强碱性阴离子交换树脂是Dowex-1。而阳离子交换树脂可对酸性和中性多糖进行较好的分离。尚红伟采用弱碱性离子交换树脂纯化大枣多糖,其产品含量达39.4%。【9】此法具有产物纯度高,污染小的优点,但此法具有洗脱体积大，后处理麻烦等缺点。
(3) 分级沉淀法
一般的单糖和小分子糖是溶于乙醇的,而分子较大的多糖在乙醇中的溶解度较低,因此,根据多糖聚合度和分子量的不同,在低级醇或低级酮中的溶解度不同,一般随着聚合度和分子量增大在醇中的溶解度逐步降低。根据这一性质,在浓缩后的多糖溶液中,分批按比例由小到大加入这些醇,使溶液中含醇量渐增,进行分级沉淀。分取各次析出的沉淀,可以粗略得到分子量不同的多糖。采用此法纯化多糖时,一般应将溶液的pH值调到7.0附近,此时多糖的性质较稳定。这种方法适于分离溶解度相差较大的多糖。除了改变溶剂的组成外,也可利用热的糖溶液逐步冷却,或逐步添加无机盐,如硫酸铵等进行盐析。
1.6 本课题研究意义
随着化学添加剂的滥用，人们对于健康，绿色的呼声越来越强烈，中药中的有效成分渐渐得到人们的青睐， 提取方法的日益革新也使天然添加剂的使用成为可能。目前，我国正在大力提倡开发天然植物类特效药，振兴祖国传统医学，因此合理开发白芨资源具有重要意义。此外，白芨在我国分布较广，生长适应条件优越，可有计划，有步骤的进行规模化人工种植，可以为我国白芨类药物提供充足的原料来源，另外，白芨可作为化妆品中的添加剂，具有美白的效果，代替了化学合成品对身体的危害。扩大白芨种植规模可以为我国的植物多糖—白芨胶的生产开辟一条新途径，以减少用于食品领域的植物胶类的进口。
1.7 有效成分的评价
(1) DPPH自由基清除能力【10】
自由基是人体进行生命活动时所产生的一种活性分子。正常情况下，自由基具有调节细胞间的信号传递和细胞生长、抑制病毒和细菌的作用，例如：自由基不断地产生并不断地被清除；其产生与清除的量达到接近平衡的正常程度；未被清除掉的自由基使重要生物大分子损伤而其损伤可得到修复，如果异常，常会影响健康，引发疾病，甚至会危及生命。
DPPH自由基是一种稳定的有机自由基，其乙醇溶液呈紫色，在波长517nm处有强烈吸收。在有自由基清除剂存在时，DPPH 的孤对电子被配对，从而使其褪色，褪色程度与其接受电子呈定量关系，因而可用比色法进行定量分析，其吸光度越低，表明清楚自由基的能力越强。
1.8本课题研究的主要内容
1.8.1确定最佳的水提工艺
以不同粉碎粒度，料液比，提取温度，提取时间对白芨多糖提取工艺进行响应面优化，确定最佳提取条件。
1.8.2确定最佳的醇沉条件
以不同的乙醇浓度，加入体积比，醇沉时间对多糖醇沉时间进行响应面优化，确定最佳醇沉条件。
1.8.3提取物的功效研究
探索白芨多糖对DPPH自由基清除能力，多糖含量以及蛋白质含量。
1.8.4结构分析和鉴定
对用提取粗多糖干粉做红外，紫外扫描，分析其结构。
2 实验材料与方法
2.1实验原材料
白芨块茎：购于蔡同德药业。
2.2主要化学试剂
名称 规格 生产厂家