叶酸偶联壳聚糖纳米粒的制备及细胞毒性的研究(5)
从大量的研究报道中，可以看出，叶酸偶联壳聚糖纳米粒是抗肿瘤药物的理想的载体。除了其本身包封率、载药率、药物缓释效果良好，其本身所具有的对肿瘤细胞的细胞毒性，可提高抗肿瘤药物的治疗效果。以叶酸作为靶向配体，使药物靶向送往肿瘤细胞内，大大降低了其对正常细胞的毒害，同时也提高了药物的利用率。
由于叶酸偶联壳聚糖在抗肿瘤治疗上有着广泛的前景，使得叶酸偶联壳聚糖的制备也成为一个热点。在大部分的研究中，其制备均是先制备叶酸活性酯，再制备叶酸偶联壳聚糖。本课题中，也采用此方法制备叶酸偶联壳聚糖纳米粒。
1.4 选题目的与意义
大部分抗肿瘤药物的靶向性差，药物毒副作用大。以壳聚糖作为药物载体，可以提高药物性能，增强疗效，但不能解决靶向性差的问题。为解决这个问题，选用叶酸作为药物的靶向配体，利用其受体在肿瘤细胞上的过度表达，以及其与受体的高度亲和力，来完成靶向的目的。研究叶酸偶联壳聚糖的制备、表征、其药物载体特性、靶向性、细胞毒性等，是将叶酸偶联壳聚糖作为抗肿瘤药物的载体的研究基础。
本课题以叶酸为配体，壳聚糖为主体，用化学方法制备叶酸偶联壳聚糖，并用红外分析偶联是否成功，再测定其偶联率，再用MTT法测定其对MCF-7肿瘤细胞的细胞毒性。用离子交联法制备叶酸偶联壳聚糖纳米粒，并测量纳米粒的粒径和Zeta电位。
2 实验部分
2.1 叶酸偶联壳聚糖的制备
2.1.1 材料、试剂与仪器
1）主要试剂
壳聚糖：梯希爱（上海）化成工业发展有限公司
叶酸：生工生物
1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(EDC)：sigma公司
无水二甲亚飒(DMSO)：solarbio
透析袋（分子截留量12000）：Sigma公司
其余试剂为国产分析纯。
2）主要仪器
集热式恒温加热磁力搅拌器（DF-101S型）：巩义市英峪予华仪器厂
紫外可见分光光度仪ultrospec 4300pro UV/visible spectrophotometer ：GE Amersham Biosciences
78一1磁力加热搅拌器：上海江星仪器有限公司
EYELA冷冻干燥机（型号FDU-1200）：上海爱朗仪器有限公司
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