野生的蛹虫草是通过各种方式，让虫草菌丝侵染鳞翅目或双翅目昆虫或蛹，以昆虫或蛹体内的营养成分作为生长的物质基础，寄生在其幼虫体内，并进行分化、发育，最终长大充满昆虫体内并穿出，形成子实体而获得[8] 。目前为止，人工培养蛹草菌主要有三种方法：半人工栽培、液体发酵和固体培养[9-10]。液体发酵可形成菌丝体，固体培养可获得子实体。我国主要利用蚕蛹人工批量培养蛹虫草子实体，因为家蚕容易饲养，在世界范围内广泛喂养，且形态与冬虫夏草下端的虫体比较接近。半人工培养蛹虫草是指人为对蚕蛹接种菌丝或喷洒孢子悬浮液并提供适宜的生长环境条件培养蛹虫草子实体的方法，包括对蚕蛹的选择、接种、培养等步骤[11]。固体培养[12] 就是用有机培养基代替蚕蛹进行蛹虫草的大规模种植。在原来已有的稳定的技术基础上，徐冲[13]等还对其进行了优化的研究。虽然蛹虫草的固体培养技术已经取得成功，但是相对液体发酵而言所需时间较长，费时费力，并且液体发酵培养基来源丰富，一般选择工业废料，培养条件容易控制，生产时间较短，产量高，尤其是对保护野生虫草资源具有重要的意义[14]。因此，近年来蛹虫草液体发酵的研究取得了一定的成就。陈晋安等[15]通过单因素筛选和正交等实验，确定了蛹虫草液体深层发酵的适宜培养条件。杨杰[16] 等把蛹虫草菌丝生物量作为指标，对蛹虫草的发酵罐培养工艺进一步优化。康超[17]等则研究不同液体发酵方式对虫草素的积累所起到的影响作用。除此之外，J。P。 Park[18]和 S。- W。 Kim[19]等也对蛹虫草液体深层发酵的最佳条件也进行了相应的实验研究。文献综述

近年来，蛹虫草的药用价值仍然是国内外研究的热点之一。自1951年德国科学家Cunningham[20]从蛹虫草中分离出虫草素，1961年Jagger[21]报道了具有抑制生长的作用，之后虫草素便被作为可能的抗肿瘤药物进行研究。1963年Klenow[22]研究出虫草素的抗肿瘤机制，证明了虫草具有抗肿瘤作用。如今还不断发现虫草对人胶质瘤细胞、睾丸间质瘤细胞等具有抑制作用[23]。但是从蛹虫草的人工培养到抑制肿瘤细胞活性检测这一比较系统的实验目前还很少，所以此次的实验一定程度上推进了蛹虫草的研发进展。

本研究旨在了解蚕蛹接种虫草菌后多肽类物质的变化情况，为蛹虫草的培养及产品的开发积累相关数据。

1材料与方法

1。1供试材料

1。1。1实验材料

虫草菌：由江苏省药用植物生物技术重点实验室提供。

蚕茧：市购。

1。1。2抑菌活性指示菌

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），大肠杆菌（Escherichia coli）：由江苏省药用植物生物技术重点实验室提供。

1。1。3培养基

LB培养基：蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，水1000mL。。如配固体培养基，加琼脂20g即可。配好的培养基121℃灭菌20min备用。

1。2实验试液来~自,优^尔-论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-

（1） 0。01mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液：称取1。5g NaH2PO4和0。125g Na2HPO4 置于烧杯中，加入蒸馏水至500mL充分搅拌，使其溶解，并进行定容。

（2） 3C的丙烯酰胺储存液10mL：用电子分析天平称取4。8g的丙烯酰胺和0。15g的甲叉双丙烯酰胺，放置于玻璃瓶中，用重蒸水溶解，配成10mL 49。5%的储存液。

（3） 5C的丙烯酰胺储存液10mL：用电子分析天平称取4。7g的丙烯酰胺和0。25g的甲叉双丙烯酰胺，放置于玻璃瓶中，用重蒸水溶解，配成10mL 49。5%的储存液。

（4） 10%的APS溶液：用电子分析天平称取0。06g的过硫酸铵，用600mL的蒸馏水溶解混匀。