1。5实验思路设计
应用单因素试验设计法和SAS实验分析法,研究不同碳源、氮源、无机盐这3个因素结合作用对甲醛降解菌生长的影响,为菌株培养条件进一步优化及产物分析提供理论依据。技术路线见图1。
图1 技术路线图
2。材料与方法
2。1 材料
2。1。1原料
淮阴师范学院树林落叶密集处采集的土壤样品。
2。1。2试剂
表2实验试剂
试剂名 级别 厂家
葡萄糖 分析纯(AR) 天津市大茂化学试剂厂
淀粉 分析纯(AR) 国药集团化学试剂有限公司
蔗糖 分析纯(AR) 国药集团化学试剂有限公司
柠檬酸三钠 分析纯(AR) 国药集团化学试剂有限公司
丙酸钠 分析纯(AR) 国药集团化学试剂有限公司
硫酸铵 分析纯(AR) 上海久亿化学试剂有限公司
蛋白胨 分析纯(AR) 国药集团化学试剂有限公司
酵母浸膏粉 分析纯(AR) 天津市大茂化学试剂厂
磷酸二氢钾 分析纯(AR) 国药集团化学试剂有限公司
磷酸氢二钾 分析纯(AR) 国药集团化学试剂有限公司
硫酸亚铁 分析纯(AR) 国药集团化学试剂有限公司
硫酸镁 分析纯(AR) 上海久亿化学试剂有限公司
2。1。3 培养基
种子活化培养基(牛肉膏蛋白胨培养基):牛肉膏0。6g、蛋白胨2。0g、氯化钠1。0g、蒸馏水200ml,pH 7。4-7。6。
菌种扩大培养基(牛肉膏蛋白胨培养基):牛肉膏3。0g、蛋白胨10。0g、氯化钠5。0g、蒸馏水1000ml,pH 7。4-7。6。
菌种基础发酵培养基:牛肉膏0。3g、蛋白胨1。0g、氯化钠0。5g、蒸馏水100ml,调pH 7。4-7。6。
培养基灭菌条件:121℃,灭菌20min。来~自,优^尔-论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-
2。1。4仪器
表3 实验仪器
仪器名称 型号 制造商
超净工作台 SW-CJ-2D 苏州净化设备有限公司
低速离心机 TDL5-A 上海安亭科学仪器厂
高压灭菌锅 LS-75HJ 江阴滨江医疗设备有限公司
微波炉 LG 乐津电子(天津)电器有限公司
恒温培养箱 GNP-9080 上海精宏实验设备有限公司