意义:通过了解其规律,不仅可以应用于细菌的培养上的问题,也可以引申到动物、人类的培养上。通关制造更适合进化的关系,使人类或是其他物种得到更好的生存条件,最终使其进化也是可能的。
单独对于细菌来说,更好的培养方式可以使得用细菌作为生产的产业获得更高的产值,或是获得更好的菌种。
对于动物来说,也可以提供一个较好范本用于研究动物间的合作关系对进化或是生存的影响。
1。3 国内外研究现状
1。4 研究内容
1。4。1 预计构建的质粒
在原有的pLuxRLasI-LacZ和pLuxILasR-LacZ质粒的基础上,我们将要切除LacZ基因部分改换成LacY基因。质粒表达的原理将于原料部分对上述两个质粒的介绍中提及。其中与源质粒唯一的不同点就在于lux box之后表达的序列由LacZ-ccd基因变成了LacY基因表达的产物为乳糖通透酶。获得的质粒在IPTG的诱导下能够表达多种信号分子,在同一个环境中培养时,两个质粒表达的信号分子互相作用就可以使目标的LacY基因表达乳糖通透酶使得我们人为破坏掉LacY基因的细菌能够利用乳糖,达到利用乳糖的条件。
(1) pLuxRLasI-LacY
这个质粒表达的基因与PLuxRlasI-LazZ只有最后Lux Box激活之后的不同,其余的表达机制和表达产物是一样的,Lux Box表达的LacY基因是细菌利用乳糖的一个重要酶——乳糖通透酶。
LuxI基因在受到激活后合成AHL信号分子,伴随着细菌的生长AHL浓度逐渐增加,当AHL在环境中的浓度满足某种阈值条件时,AHL将会和R蛋白结合形成R*蛋白:
LuxR基因受到IPTG激活控制合成R蛋白,并且同时使Lux Box处于待激活状态。当R蛋白与AHL浓度达到其阈值之后就会结合形成R*蛋白,R*蛋白能够激活处于待激活状态的Lux Box使Lux Box后的LacY序列得到表达。来-自~优+尔=论.文,网www.youerw.com +QQ752018766-
LasR,LasI以及Las Box的关系和上述基因的关系一样。
如图1。1所示。
图1。1 质粒pLuxRLasI-LacY
(2) pLasRLuxI-LacY
这个质粒的运作机理与前者相同,质粒图谱如图1。2所示。
图1。2 质粒pLasRLuxI-LacY
1。4。2 原材料质粒
PLuxRlasI-LazZ质粒与pLuxIlasR-LacZ质粒是本次构建合作关系质粒的原材料,质粒的图谱如图1。3与图1。4所示。
LuxI基因在受到激活后能控制AHL的合成,伴随着细菌的生长AHL浓度逐渐增加,当AHL在环境中的浓度满足某种阈值条件时,AHL将会和R蛋白结合形成R*蛋白:
LuxR基因受到IPTG激活控制合成R蛋白,并且同时使Lux Box处于待激活状态。当R蛋白与AHL浓度达到其阈值之后就会结合形成R*蛋白,R*蛋白与Lux Box结合就能使Lux Box后的基因序列得到表达。
LasR,LasI以及Las Box的关系和上述基因的关系一样。
图1。3和图1。4分别为PLuxRlasI-LazZ质粒与pLuxIlasR-LacZ质粒的质粒图谱。