究，可以有效检验生物入侵机制的理论和假说，深入说明植物入侵的机制，为制定入 侵植物的防控策略提供指导。全境性研究完善了入侵生物学的研究方法，为入侵生物 学研究提供了更为可靠准确的结果，有助于入侵植物的防控实践[20]。

第 2 章 材料与方法

2。1 实验材料

菌株 L1：由江苏科技大学生物技术学院食品生物技术实验室从加拿大一枝黄花 植物中分离得到。

芝麻（Sesamum indicum ）、油麦菜（Lactuca sativa L。）、小麦（Triticum aestivum linn），种子均购自镇江市蔬菜种子公司。

2。2 实验试剂及配置

2。2。1 实验试剂 葡萄糖：国药集团化学试剂有限公司； 蛋白胨：天津凯通化学试剂有限公司； 次氯酸钠：国药集团化学试剂有限公司； 苯酚：国药集团化学试剂有限公司； 浓硫酸：国药集团化学试剂有限公司； 牛血清白蛋白：上海伊卡生物技术有限公司； 磷酸二氢钠：国药集团化学试剂有限公司； 磷酸氢二钠：国药集团化学试剂有限公司； 磷酸：上海凌峰化学试剂有限公司； 考马斯亮蓝：国药集团化学试剂有限公司； 丙酮：上海苏懿化学试剂有限公司； 正己烷：国药集团化学试剂有限公司； 氢氧化钾：国药集团化学试剂有限公司； 石油醚：国药集团化学试剂有限公司； 乙酸乙酯：国药集团化学试剂有限公司； 二氯甲烷：国药集团化学试剂有限公司； 甲醇：国药集团化学试剂有限公司； 乙醇：无锡市亚盛化工有限公司； 铁氰化钾：国药集团化学试剂有限公司； 三氯化铁：国药集团化学试剂有限公司；

香草醛：上海展云化工有限公司。

2。2。2 主要试剂的配置

（1）70 %乙醇溶液

量取 70 mL 乙醇，加入 30 mL 蒸馏水，混匀。

（2）5 %次氯酸钠溶液

量取次氯酸钠 5 mL，加 100 mL 蒸馏水，搅拌均匀，保鲜膜封口避光保存。

（3）6 %苯酚溶液

称取 6 g 苯酚，加入 94 mL 蒸馏水，搅拌均匀，放入棕色瓶中避光保存。

（4）磷酸缓冲溶液

称取 7。16 g Na2HPO4 加入 100 mL 蒸馏水中充分混匀，为母液 A。称取 3。12 g NaH2PO4 加入 100 mL 蒸馏水中充分混匀，为母液 B。分别量取母液 A 62 mL 和母液 B 38 mL，搅拌均匀保存备用。

（5）考马斯亮蓝溶液

称取 0。1 g 考马斯亮蓝(G-250)，溶于 50 mL 95 %乙醇中，加入 85 %的磷酸 100 mL， 用蒸馏水定容至 1 L，滤纸过滤到棕色瓶中保存备用。

（6） 10 mM 氢氧化钾

称 0。56 g 的氢氧化钾溶于 1 L 蒸馏水中配制而成。

（7）100 μg/mL 的葡萄糖标准溶液

将葡萄糖在恒温干燥箱中 105 ℃下干燥至恒重，准确称取 10 mg，用少量蒸馏水 溶解后，移入 100 mL 容量瓶中，用蒸馏水定容至 100 mL，充分混匀，4 ℃冰箱中保 存。

（8）1 mg/mL 的牛血清白蛋白蛋白标准溶液

准确称取 0。1 g 牛血清白蛋白，用少量蒸馏水溶解后移至 100 mL 容量瓶中，定 容，4 ℃冰箱中保存。

（9）展开剂 石油醚:乙酸乙酯（5:1；1:1），二氯甲烷:甲醇（20:1；10:1），按比例各配 100 mL，

摇匀备用。

（10）显色剂

硫酸乙醇：量取 10 mL 硫酸，用乙醇稀释至 100 mL，放入棕色瓶中保存备用。

铁氰化钾-三氯化铁：1 %铁氰化钾水溶液，2 %三氯化铁水溶液，临用前等体积 混合。

（11）100:1 洗脱液

1 L 二氯甲烷加入 10 mL 甲醇充分混匀。

（12）100:2 洗脱液

1 L 二氯甲烷加入 20 mL 甲醇充分混匀。