（13）100:3 洗脱液

1 L 二氯甲烷加入 30 mL 甲醇充分混匀。

（14）100:5 洗脱液

1 L 二氯甲烷加入 50 mL 甲醇充分混匀。

（15）100:10 洗脱液

1 L 二氯甲烷加入 100 mL 甲醇充分混匀。

2。3 主要仪器

超净工作台

722 型可见光分光光度计 电子天平 SW-CJ-IF 01080010

YP5001 苏州安泰空气技术有限公司 上海凤凰光学科仪有限公司 上海海康电子仪器厂

控温摇床 DHZ-052D 上海博彩生物科技有限公司论文网

台式离心机 TGL-16G 上海安亭科学仪器厂

上海博讯实业有限公司医疗设备

人工气候箱 BIC-300

厂

高压蒸汽灭菌锅 YX-280B 上海三申医疗器械有限公司

多功能电磁炉 C19-SH1982 广东美的生活电器制造有限公司

电热鼓风干燥箱 DHG 9240A 上海一恒科学仪器有限公司

旋转蒸发仪 N-1100V 东京理化

层析柱 BZ24/29 泰州市沪可玻璃制品有限公司

三用紫外分析仪 ZF-Ι-型 上海顾村电光仪器厂

冰箱 BCD-206YH 型 青岛海尔股份有限公司

恒温水浴锅 HH 江苏金坛市中大仪器厂

2。4 培养基

麦芽固体培养基：称取麦芽 6。5 g，加水煮沸 20 min，补充水至 300 mL，加入蔗

糖 6。5 g、琼脂 1。5 g，121 ℃灭菌 20 min，冷却后倒入平板，待其凝固可使用。

发酵培养基（麦芽液体培养基）：称取麦芽 20 g，加水煮沸 30 min，补充水至 1

L，加入蔗糖 20 g、蛋白胨 3 g，121 ℃灭菌 20 min，备用。

2。5 菌株的活化及发酵

活化：无菌操作下将菌种接种到麦芽固体培养基中，保鲜膜封闭培养皿的边缘， 在 28 ℃下恒温培养 3-5 d，备用。

发酵：将活化过的菌种接种到麦芽液体培养基中，在 28 ℃，120 r/min 条件下振 荡发酵 12 d。

2。6 菌丝体色素的提取

用四层纱布过滤，所得的菌丝体在研钵中用少量液氮充分研磨。研磨的菌丝体用 70 % 的乙醇为提取剂，在超声波提取器中提取 2 h 后，离心 10 min （5000 rpm）， 取上清。上清液为橘红色澄清液。提取液用旋转蒸发仪浓缩后获得固体物，固体物用 蒸馏水配置成 10 mg/mL 的母液并保存在冰箱中备用。取适量母液，用蒸馏水稀释到 0。25 mg/mL、0。5 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、4 mg/mL 等 5 个浓度的水溶液备用。

2。7 色素对本土植物的化感作用

2。7。1 色素对种子发芽的影响

（1）种子的培育

选取油麦菜、小麦和芝麻作为实验对象。用 5 %次氯酸钠溶液对种子进行表面

消毒 30 min，蒸馏水反复洗净。将处理好的种子均匀置于铺有用蒸馏水润湿的双层滤

纸的培养皿上，芝麻和油麦菜每只培养皿放 50 粒种子，小麦每只培养皿放 30 粒种子。 每个浓度设三个重复，蒸馏水处理为对照。培养皿加盖在白天/黑夜温度 28 ℃/25 ℃、 湿度 75 %、光/暗周期 12 h/12 h 的恒温培养箱中进行培育。期间每天向培养皿中加入