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C0=A/e×D
C0:总巯基的摩尔浓度（mol/g）；A412:412nm处的吸光度；D:稀释倍数；e:分子吸光系数13600L/(mol•cm)
1.3.12 表面疏水性测定
表面疏水性的测定依据Hayakawa等[14]的方法，用1-苯氨基萘-8-磺酸（ANS）作为荧光探针进行测定。使用磷酸缓冲液（0.6 M KCl、20 mM K2HPO4、20 mM KH2PO4、pH 6.5）将蛋白样品稀释到2mg/mL，取4mL样液先于25°C下保存5min，再冰浴10min。加入20μL 1-苯氨基萘-8-磺酸（ANS，15mM），在25°C避光反应20min。选择激发波长为375nm，发射波长为440～600nm测定荧光强度，取同一浓度未加荧光探针的蛋白质溶液的荧光强度为空白，以蛋白质质量浓度（mg/mL）为横坐标，荧光强度为纵坐标，表面疏水性为拟合曲线的斜率。每个处理重复3次，取3次测量的平均值作为测定结果。
2 结果分析
采用SPSS统计分析软件对测定指标进行单因素方差（One-way ANOVA）分析，使用Duncan法进行多重比较，差异性显著建立在P＜0.05水平。