本研究以市场所售伊利风酸乳(原)为实验样品,每组实验中均取酸乳样品1 mL,分别稀释到最适的倍数接种到LAB培养基上进行37℃培养,72 h后选取菌落数量在30-300 cfu/mL的培养皿计算乳酸菌的数量并记录,然后绘制乳酸菌的数量∕时间曲线图。对比国家标准(GB19302-2010)[2],检验实验所用酸奶样品是否合格。本实验选择三种测定温度即4℃、37℃和常温(4月),在此基础上增加了模拟酸奶购买过程的测定,即测定酸奶样品在4℃条件下保存时乳酸菌数量,测定完毕将酸奶样品放至常温下保存5 h后再次测定酸奶样品中乳酸菌数量,比较这一过程中酸奶样品中乳酸菌数量的动态变化。这样不仅测定了酸奶样品在同种温度下乳酸菌数量的动态变化,也测定了不同温度下乳酸菌数量的动态变化,打消人们担心在酸奶购买过程中酸奶品质会变化的顾虑。
1. 材料与方法
1.1 试验样品
市售伊利风酸乳(原),4℃条件下保存的酸奶的生产日期分别为4月15号(标注为A)、4月17号(标注为B)、4月19号(标注为C)。常温条件下保存的酸奶的生产日期分别为4月15号(标注为A1)、4月17号(标注为B1)、4月19号(标注为C1)。37℃条件下保存的酸奶的生产日期为4月19号(标注为C2)。
1.2 主要试剂与仪器
1.2.1 试剂
生理盐水配制:称取9 g NaCl加入干净烧杯中,取适量蒸馏水溶解,并在容量瓶中定容至1000 mL,备用。
1.2.2 主要仪器
电子天平(JD200-3) 沈阳龙腾电子有限公司
电热恒温鼓风干燥箱(GZX-9240MBE) 上海博迅实业有限公司
显微镜CX21FS1 OLYMPUS
立式压力蒸汽灭菌器( LDZX-50KB) 上海申安医疗器械厂
电热恒温培养箱(DHP-9162) 上海一恒科学仪器有限公司
洁净工作台( SW-CJ-2F) 苏州安泰空气技术有限公司
海尔冰箱(BCD-215KCM) 青岛海尔股份有限公司
万用电炉(DL-1) 北京中兴伟业仪器有限公司
1.3 培养基
因为本实验是要计算乳酸菌数量,而乳酸菌深层培养生长出来的菌落比表面培养生长出来的菌落质量更好,数量更准确,再根据预实验测试以及所查资料,确定使用LAB培养基最为合适。
1.3.1 培养基主要成分
牛肉膏10 g、酵母膏10 g、乳糖20 g、吐温80 1.0 mL、无水碳酸钙10 g、无水磷酸二氢钾2 g、琼脂10 g、蒸馏水1000 mL[3]。
1.3.2 培养基的的配制及其灭菌
取一个干净烧杯盛500 mL蒸馏水于电炉上加热,水沸后依次加入已称量好的牛肉膏10 g、酵母膏10 g、乳糖20 g、吐温80 1.0 mL、无水碳酸钙10 g、无水磷酸二氢钾2 g,加入后用玻璃棒不断搅拌,然后加入琼脂10 g,同时调低电炉温度,不停搅拌,等到琼脂全部溶解后将pH值调到6.6,定容至1000 mL,分装培养基。
1.4 实验方法
菌落测定:采用平板培养计数法。
2. 实验过程
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