里氏木霉及其纤维素酶自从1906 年纤维素酶从蜗牛消化液中被分离出来后，人们便开始了对纤维素酶的广泛研究。纤维素酶的来源非常广泛,昆虫、细菌、放线菌、真菌、动物体内都能产生。直到20 世纪50 年代初,Reese 和Mandel发现里氏木霉(Trichoderma reesei)所产的纤维素酶体系效果好，具有商业化应用的可能性。里氏木霉是一种好氧的丝状真菌，是多细胞真核微生物，其分泌的纤维素酶是胞外酶，经初提和分离纯化就可得到纤维素酶制剂[3]。由于里氏木霉产纤维素酶量高、稳定性好、适应性强、且可以通过物理和化学诱变获取高产菌株，便于生产和管理，因此研究和利用价值突出。77990

纤维素酶不是单个酶，它是指降解纤维素的一组酶的总称，是起协同作用的多组分复合酶系。纤维素酶主要由3种酶组成：内切型-β-葡聚糖酶（EC3。2。1。4）,外切型-β-葡聚糖酶（EC3。2。1。91，也称纤维二糖水解酶）和纤维二糖酶（EC3。2。1。21，也称β-葡萄糖苷酶）[3]。纤维素酶具有特异性高，反应条件简单，降解过程中不会污染环境等优点，是将纤维素和半纤维素转化成葡萄糖的关键。纤维素酶和一般酶反应的区别在于纤维素酶是多组分酶系。在水解纤维素为葡萄糖的过程中，必须依靠不同组分之间的协同作用才能完成。其作用机理：大分子首先在内切葡聚糖酶的作用下产生新的游离末端，然后由外切葡聚糖酶在新产生的还原端或非还原外切纤维素链，生成纤维素二糖（或葡萄糖），再由β-葡萄糖苷酶水解纤维二糖生成两个葡萄糖[4]。目前，纤维素酶的产酶菌株的活力还不是很高，因此其生产成本太高，限制了其进一步的应用。所以，酶解成本过高是制约纤维素转化为生物乙醇的主要障碍，其占总生产成本的比例很大，只有将酶的成本降低，生物乙醇才有可能与石油竞争。纤维素酶的生产是成功的酶促转化纤维素生物质为生物乙醇的重要因素之一。因此，选育出高产纤维素酶且酶活性稳定的产酶菌株至关重要。

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迄今为止发现的产生β-葡萄糖苷酶的生物类群包括原核生物、真核生物和古细菌。虽然β-葡萄搪苷酶广泛存在于微生物和植物中, 但植物来源的β-葡萄糖苷酶活性远比微生物来源要低, 所以目前对β-葡萄糖苷酶的研究主要集中在微生物上。能产β-葡萄糖苷酶的微生物种类极多, 分布在陆地及海洋微生物中。主要包括好氧及厌氧的细菌、丝状真菌、放线菌、酵母、藻类及古细菌等[5]。这其中既有生长在潮湿环境中, 可以分解植物残体的腐生菌, 也有能够侵染植物的寄生菌以及反当动物体内的瘤胃微生物。在一些极端环境如盐碱湖、热泉中也发现具有产β-葡萄糖苷酶能力的微生物。

β-葡萄糖苷酶是纤维素降解酶系的主要组分之一，它能够水解结合于末端非还原性的β-D-葡萄糖苷键，同时释放出β-D-葡萄糖和相应的配基，在人类、动物、植物和微生物的糖类代谢方面都具有重要的价值[6]。目前，β-葡萄糖苷酶已经广泛应用于食品、酿酒、医药、化工及粮食加工等领域，可用于改善茶叶、果汁的风味，生产低聚龙胆糖、大豆异黄酮活性苷元和天然抗氧化剂多酚化合物等方面。本实验主要对β-葡萄糖苷酶Bgla进行克隆并为后续的对里氏木霉纤维素酶的表达及其酶活的影响做铺垫

参考文献

1。王建平, 陈小娥。 纤维素酶的研究概况[J]。 浙江水产学院院报, 1996, 15(2): 140-144

2。朱凤妹，彭丽莎等。葡萄糖甘酶基因克隆及在丝状真菌中高效表达的研究进展[J]。食品安全质量检测学报，2014,5（10）：3052-3058