1。普通蚕茧由内层丝素蛋白和外层丝胶蛋白两部分组成,丝胶包裹在丝素的外围,起到保护和胶黏丝素的作用,可以防止外部摩擦对蚕丝纤维造成损伤,因此,在纺织工业中,丝织物要到染色、整理工序时才将丝胶全部洗脱。洗脱工序导致丝绸炼染厂和缫丝车间的污水中含有高浓度的丝胶蛋白,如果直接将其排放入河道,不仅造成了丝胶资源极大的浪费,而且污染了水源,丝胶蛋白会提高水中的溶解氧,进而使水体丧失自净能力。因此,对丝胶蛋白的开发与利用,一方面减轻了丝胶污水对环境造成的压力,保护了环境;另一方面将丝胶蛋白作为自然资源,有着十分重大的经济意义。86855
随着近几年国内外学者对丝胶蛋白结构与性能的研究不断深化,对丝胶蛋白的开发和利用也越来越深入。丝胶蛋白的用途越发广泛,产品日益增多,现已广泛应用于织物涂层、化妆品,以及食品、医药、功能性材料等方面。
2 丝胶蛋白的结构与特性
包裹于蚕茧中丝素的外层丝胶层,约占蚕茧质量的25%,该层对内层丝素起到保护作用,除含有少量蜡质、碳水化合物和色素以及无机成分外,主要成分为丝胶蛋白(常称为丝胶)[1]。
丝素蛋白是纤维状的蛋白质,构造较为简单,就一级结构而言,常出现序列相同或相似的重复肽段,二级结构的组成也比较单一,少有转角、环状和无规则卷曲等结构。而丝胶蛋白是一种球状蛋白,结构较为复杂,相对分子质量约1。4-31。4万,由18种不同氨基酸构成,其中天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)和丝氨酸(Ser)含量较高,分别约占总质量的16。71%、13。49%、和33。43%。丝胶蛋白的二级结构主要是无规则卷曲结构,含有部分β折叠,几乎不含有α螺旋结构[2]。论文网
在蚕茧中,接近丝素层的丝胶蛋白含有β结构相对外层要多,但外层丝胶在环境的影响下,部分无规则卷曲结构会向β结构发生不可逆转化。
球状蛋白质带有极性残基的氨基酸含量较高,当其形成三级结构时,一些相对规则的结构会扩散到球状蛋白内部并使得蛋白质变为更为致密的结构。丝胶蛋白的这种结构阻碍了其的开发利用,制约了其被开发为生物材料。
从丝胶蛋白的结构来看,作为一种优质的蛋白质资源,与丝胶蛋白相比,其降解特性、凝胶-溶胶转化特性要更好,用作特定范围的生物材料时有着更明显的优势。
因研究的角度不同,研究丝胶蛋白组成的实验采用的方法和手段也有所不同, 因此得到的结果也会有所不同。金子英雄[2]用盐析法分离丝胶得到易溶性A型丝胶与难溶性B型丝胶两种丝胶。清水正德[2]提出控制不同的时间,将茧层加水煮沸,分离出三种溶解性不同的丝胶。小松计一[2]在清水正德工作的基础上, 运用紫外分光光度法进行分析,提出茧丝中存在四种丝胶 ( 分别称为丝胶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)的观点。 涉川明朗[2]从组织学的角度将丝胶区分为3种,分别称为内、中、外层丝胶。 蒲生卓磨[2]等将中部丝腺切成5个部分,从各部分抽出蛋白质,进行凝胶电泳,分离出相对分子量不同 (8~30万)的5种多肽。 从基因表达的角度来[2]看,目前已有5种丝胶基因被克隆和部分测序,共分离到由这5种丝胶基因转录的9种mRNA,由此可以推测丝胶蛋白可能含有9种多肽。
3 丝胶蛋白的分离
目前研究丝胶蛋白时主要使用酶解法、酸解法、高温水解法、碱水法、有机溶剂法等方法分离提取丝胶蛋白。现将几种主要丝胶分离方法简述如下:
高温热水法[3]:将蚕茧浸泡于热水中,丝胶溶解于热水而丝素不溶。再采用过滤或离心等方法去除丝素获得丝胶蛋白水溶液。在通过干燥丝胶蛋白溶液即得到丝胶蛋白粉末。此方法获得的丝胶不会引入其他杂质,但产率较低。