碳酸钠法[4]:将蚕茧浸于碳酸钠水溶液中,在一定温度下,丝胶蛋白溶解于碳酸钠水溶液中而丝素不溶。通过过滤、离心等方法去除丝素后,再将获得的碳酸钠丝胶混合溶液进行透析、浓缩或干燥获得丝胶蛋白。碳酸钠法被广泛地应用于从蚕丝中分离丝胶蛋白,此方法在提取家蚕和非家蚕丝胶蛋白均有报道。Haesung Yu [5]等采用碳酸钠水溶液法从野蚕蚕茧分离提取丝胶,研究了碳酸钠浓度(C)和煮沸时间(T)对丝胶产率和丝胶分子量分布的影响,提出了采用 0。02 M碳酸钠煮沸 60 min 分离丝胶比较理想[5]。此方法丝胶产率高,但对丝胶的结构破坏比较严重。
酸析法:利用丝胶蛋白在等电点(pH 3。8~4。5)溶解度最低的特点,丝胶蛋白从水溶液中析出,再通过回收进而加以利用的方法。此方法常用于工业分离蛋白质。该方法的优势在于工艺流程简单,获得的丝胶蛋白纯度高,提取成本相对较低,但提取率不太理想。另外,由于调节溶液的酸碱度时常采用氢氧化钠和盐酸,这又会导致产物中因含有盐酸和氯化钠等杂质,使其无法直接应用于医药领域,因此该方法获得的丝胶蛋白仍需进一步纯化。最近几年也有关于采用柠檬酸代替盐酸提取丝胶蛋白的报道。
柠檬酸法[6](Citric Acid)利用丝胶可溶解于沸腾柠檬酸水溶液中,而丝素不溶解的特性,将溶解后的丝胶柠檬酸混合溶液进行透析和浓缩即可获得丝胶蛋白。但此方法在透析的过程中丝胶蛋白会从溶液中析出,难以收集,而析出的丝胶难以复溶回溶液。