考试焦虑是生活常见的焦虑形式,但是在重要考试前吃巧克力、坚果类的食物可以明显缓解人们的焦虑情绪。实验研究也表明,当处于压力条件下时,人和啮齿动物会增加美食(“美食”通常用于表示含有大量碳水化合物或脂肪的热量密集的食物)。并且美食具有享乐属性即奖赏属性,这在缓解应激过程中起着主要作用[3-5]。美食是如何缓解应激的呢?其中终纹床核BNST,是杏仁核的延伸,是中枢神经系统(CNS)中应激和奖赏的整合中心,在啮齿动物和猩猩中调节应激和奖赏的关系。BNST是复杂的结构,可以被分为多个亚区,是一个异质核型的,由不同多种细胞类型和亚核组成的,可以被细分为不同的神经元,亚循环通路,在应激和奖赏通路中都起了一定的作用,应激会使BNST中促肾上腺皮质激素释放激素 CRF mRNA的表达增加,并且CRF mRNA的过表达是焦虑产生的重要机制。实验研究发现,两个BNST分区对焦虑状态产生相反的影响: BNST的卵型核的活动促进了几个独立的焦虑状态特征,而前背区的BNST相关活动对同样的特征产生了抗焦虑作用,并且损毁BNST可以显著减弱焦虑行为。Michelle T[6]等给予一周大鼠猪油或/和蔗糖等美食后进行束缚应激,发现下丘脑和终纹床核卵圆核(BNSTov)促肾上腺皮质激素(CRF)mRNA表达量都比对照组下降。这也表明了美食能够减缓应激引起的焦虑行为。
本实验研究目的是通过观察低氧暴露、糖摄入、BNST中CRF mRNA的表达量对焦虑行为的影响;其中包括低氧暴露前和低氧暴露中糖摄入对焦虑行为的影响来探讨应激与糖摄入对焦虑行为的耦合作用。
2 实验材料与方法
2。1实验动物
实验采用淸洁级SD(Sprague-Dawlcy)雄性大鼠,体重为200±30 g,全部大鼠购自浙江省医学科学院动物中心。进入实验室后,大鼠分别用标准的饲养箱独笼独只饲养,每笼大鼠给予充足的食物和饮用水。饲养环境:环境温度控制在22±1℃,湿度控制在60±10%,光照周期为12L:12D。适应饲养一周后开始正式实验研究。论文网
2。2 实验设备
饲养设备:塑料饲养笼(25cm×l6cm×13cm);200ml塑料水瓶
低氧暴露设备:低压氧舱,模拟5000米高度的低氧刺激
行为检测设备:自主活动旷场箱,四壁黑色,底面用白线(或软件:动物运动轨迹跟踪系统)划分面积相等的25块的木质立方体箱,其中外周边缘的16格称为外周格,内部的9格称为中央格,规格通常为100 cm×100 cm×50 cm。高架十字迷宫由距离地面50cm的十字架迷宫组成的,包含两个封闭臂(50 cm×10 cm×1 cm)和两个开放臂(50 cm×10 cm×30 cm)相互在中央平台(10 cm×10 cm)交叉垂直成十字形状。
主要实验仪器:
制冰机 GRANT XB型
超净工作台 ESCO Laminar Flow Cabinet
荧光定量PCR仪 Aligent stratagene M×3005P
移液枪 德国Eppendorf 公司生产
超低温冰箱 U410,NBS公司
全自动高压灭菌锅 HVE50,HIRAYMA 公司
冰冻切片机 HM550,Microm 公司
台式高速冷冻离心机 5804R,Eppendorf公司
微量测定分光光度计 美国Thermo Scientific 公司
NanoDrop TM2000型
2。3实验试剂
PrimeScript RT reagent Kitwith gDNA Eraser