摘要：细胞固定化是为了能使细胞保持其原有活性还能被反复使用，而使用各种物理或化学方法将游离的细胞固定于某一限定的区域里的一种技术。细胞固定化并不只局限于一种方法，只要能够起到限制游离细胞的自由流动的作用，就能用于固定细胞。从操作简单，对游离细胞活性影响小，成型方便等方面考虑，选择海藻酸钙包埋法作为固定产酯酶重组大肠杆菌细胞的方法。为此我对固定化条件进行了研究，分别从产酯酶重组大肠杆菌细胞浓度，海藻酸钠浓度，氯化钙浓度，细胞硬化时间以及固定化细胞重复反应次数来考察海藻酸钙包埋法固定大肠杆菌细胞的最优条件，得出结论为：最优游离大肠杆菌细胞浓度是20g/L，最优海藻酸钠溶液的浓度为2。0%，最优氯化钙溶液的浓度为0。2mol/L，最优硬化时间是24h，固定化细胞可以重复反应5次，其中第一次反应相对酶活最高。71935

毕业论文关键词：酯酶、固定化、海藻酸钙包埋法、条件优化

Immobilization of Esterase Producing Recombinant E。 coli cells 

Abstract: Cell immobilization was a physical or chemical method used for locating free cells within a limited area, making it keep active and being repeated use of a technique。 Cells immobilized method is varied, as long as it can limit the free flow of cells, can be used in fixing cells。 Taking a simple operation, small impact on the cell activity, forming convenience into consideration, Calcium alginate embedding method have been chosen to fix esterase producing recombinant e。 coli cells。 Therefore I studied the  immobilization conditions, respectively from the different concentrations of esterase producing recombinant e。 coli cells, different concentrations of sodium alginate, different concentrations of calcium chloride, different cell hardening time and repeated reaction times of free cells to examine the optimal conditions of calcium alginate embedding fixed estera

se producing recombinant e。 coli cells。 And it came to the conclusion that the optimal concentration of free e。 coli cells was 20 g/L, the optimal concentration of sodium alginate solution was 2。0%, the optimal concentration of the calcium chloride solution was 0。2 mol/L, and the optimal curing time was 24h, immobilized cell can be repeatedly reacted five times, the first reaction of relative enzyme activity was the highest。

Key Words：esterase, cell immobilization, calcium alginate embedding, optimal condition

目  录

1  研究背景 1

1。1 产酯酶重组大肠杆菌 1

1。1。1 酯酶的简介 1

1。1。2 酯酶的应用 1

1。1。3 重组大肠杆菌的概述 2

1。2 固定化细胞简介 3

1。2。1 固定化细胞的定义 3

1。2。2 固定化细胞的优势与劣势 3

1。2。3 固定化细胞常用载体 4

1。2。4 固定化细胞的应用 5

1。2。5 固定化细胞未来的发展前景 7

2  实验原理和流程 8

2。1实验原理 8

2。1。1 固定化细胞的制定方法 8

2。2实验方案的确定 9

3  试验方法与材料 10

3。1 实验材料