1。1。2 酯酶的应用

在研究领域，酯酶是较早被研究的一类酶和也被用作重要的生物催化剂，如今在工业领域其作用也越来越大。

首先是将酯酶运用在制药行业，尤其是对于手性药物的制备。上世纪五、六十年代的“反应停”事件引起了社会各界的关注，医药行业也开始重视手性药物的研究，截止目前，由于酯酶的立体选择性使其较为广泛的运用在了制备手性药物上，所以在医药行业里研究出的手性药物超过一半以上都与酯酶的立体选择性相关。例如：2000年，为了拆分2-苯丙醇因而利用了Pscudomaonas脂肪酶和猪胰脂肪酶两种酶，两种酶通过催化酯交换，明显提高了对映体拆分率 [3]；也有文献报道对于脂肪酶的可溶性的表达可在某种来自粘质沙雷菌的大肠杆菌中达成，(R,S)-酮洛芬酯的酯键会在反应中重组菌的作用下发生水解最后得到(S)-酮洛芬 [4]；具有强立体选择性的D-泛解酸内酯酶是由孙志浩课题组通过筛选得到的，泛解酸内酯会在D-泛解酸内酯酶的选择性作用下进行水解并得到光学纯度较高的D-泛解酸，如今这种方法已经成功工业生产中得到应用[5]。

酯酶同样也在食品加工领域起作用。在酿酒行业中使用酯酶或加入乙酸乙酯、乳酸乙酯等食用酯类的含量可以增加酒类的口感；在2005年，固定化的Rhizopussp。脂肪酶被Melo的课题组用于合成香茅醇芳香酯；此外有些酯酶还可用于脂肪酸和甘油之间的反应，使其在一定的条件下在酯酶的催化下发生酯化反应，其中大量游离的脂肪酸在酯化反应中被转化为中性甘油酯，提高了食用油的价值为人们带来更多的益处[6-7]。论文网

当然酯酶也可以运用在其他领域，例如在动物饲料里加入阿魏酸酯酶作为添加剂，可以提高消化率，在去污类产品和洗涤剂通常加入嗜冷型酯酶作为添加剂，提高去污能力，在造纸过程中加入某些酯酶可以减少氯的消耗，改善纸浆的亮度等[8-11]。

1。1。3 重组大肠杆菌的概述

大肠杆菌其学名是大肠埃希氏菌，它是一种革兰氏阴性菌(G-)。大肠杆菌主要存活在大肠内，在很长一段时间人们都认为它是人体肠道内正常存在的一种菌落，不会使人致病。直到20世纪中叶，人们才认识到大肠杆菌存在于人和动物体内会含有病原性。大肠杆菌是一种短杆菌，在显微镜下观察呈条状，细胞周围长满了鞭毛，会自由移动，且同病毒一样不含有芽孢。当人体抵抗力较弱大肠杆菌入侵某些部位造成感染后，人体会表现出的症状有炎症腹泻等，它作为一种结构简单的单细胞微生物，具有很快的繁殖速度且较易培养，因此一直被用于各种生物学上的研究。

大肠杆菌主要应用于生物技术方面，它是一种原核受体菌，在基因研究中起到十分重要的作用。在经过不断的筛选和区分得到的菌株已经不同于原来的菌株，这种菌株已经没有细胞壁因此其自身或依靠环境都不能进行繁殖。

此外，在分子克隆实验使用的菌株需要将其基因组进行优化，通过这种方法达到菌株的基因型与原有菌株基因型的不同，使分子生物工程实验更好的进行。在大肠埃希氏菌中表达出真核微生物的基因的前提是使给真核微生物的基因一个合适的载体。基因工程菌是为了得到某种需要的细菌，而人工地在特有细菌体内加入具有遗传性状的细菌，常见的基因工程菌有大肠杆菌。例如，在实验研究中，科学家在大肠埃希氏菌的细胞里加入了人的胰岛素的基因，胰岛素的基因与大肠埃希氏菌中有遗传能力的物质相连接。在含有胰岛素基因的大肠埃希氏菌的细胞里，大肠杆菌由于被胰岛素基因诱导而产出胰岛素。随着大肠杆菌的不断繁殖，胰岛素基因的基因也会被遗传下去，从而使得后代的大肠杆菌同上代细胞一样能够生产出胰岛素。在本次论文研究中，我们所使用的菌种就是重组大肠杆菌，因为大肠杆菌相较于其他细菌具有很多优点，比如它易培养，易观察，毒害小等。