3。1。1 主要试剂 9

3。1。2 主要仪器 9

3。2 固定化条件的优化 9

3。2。1 pH的优化 9

3。2。2 固定化温度的优化 10

3。2。3 固定化时间的优化 10

3。2。4 PBS浓度的优化 10

3。2。5 戊二醛交联浓度的优化 11

3。3 固定化酶性质的探究 11

3。3。1 pH稳定性 11

3。3。2 温度稳定性 11

3。4 乙酰胆碱酯酶活性的测定 11

3。5 考马斯亮蓝法测上清液的蛋白含量 12

4结果与讨论 13

4。1 固定化条件优化 13

4。1。1 pH对酶固定化的影响 13

4。1。2 固定化温度对酶固定化的影响 13

4。1。3 固定化时间对酶固定化的影响 14

4。1。4 PBS浓度对固定化酶的影响 15

4。1。5 戊二醛交联浓度对固定化酶的影响 15

4。2 固定化酶性质 16

4。2。1 pH稳定性 16

4。2。2 温度稳定性 16

4。3 考马斯亮蓝法测蛋白 17

4。4 乙酰胆碱酯酶的分子对接 18

5总结与展望 19

致谢 20

参考文献 21

1研究背景

1。1 食品中的农药污染

我们都知道，农药可以通过杀灭有害的昆虫、草类等来保护农林业的植物，它的创造和应用大大提高了农业生产力。不仅如此，农药还能提高我们身处的环境质量，甚至是在疾病方面，它也能起到制止的作用。当然，这些美好结果的前提是适度的使用农药。而不是像现在这样过度的使用，使我们身处的周围都陷入农药污染的恐慌中，尤其是食品深受农药的严重影响，越来越多的食品污染事件不断在发生，而最后一切后果的承受者都将是我们人类自己，如果再不采取立即有效的措施制止和改善，这种严重的食品污染终将对我们留下巨大的创伤。农药对人体的危害除了发生急性中毒外，更是能通过污染食品的方式形成对人体的慢性中毒。目前在我国的食品中，最主要的污染源头非有机磷和氨基甲酸酯类农药莫属了[1]，这两类农药是通过抑制体内乙酰胆碱酯酶的活性，来使人或动物出现中毒症状，严重的话更会危及生命[2]。

农药污染食品的途径：

①喷洒农作物：此途径是最直接污染食品的，其中食品受农药的污染程度还与喷洒农药的次数、农药的浓度等因素直接有关。

②植物根部吸收：农药喷洒后，或许是因为喷洒方式的问题，大部分会在泥土中，这些在泥土中的农药则会由植物的根部吸收后蔓延到植物的各个部位，因此，食品会受到农药的污染，而且污染程度是随着留在土壤中农药含量的增加而增加。

③混放：食品和农药在运输和储存中没有做好有效的隔离控制，造成食品被农药污染的后果。