存盐类、水体的pH值等情况都对絮凝效果有较大的影响[3,7]。投入生产的絮凝剂其絮凝效果的好坏主要取决于絮凝剂的性质,絮凝设备的动力学条件也是重要影响因素之一[8]。目前对微生物絮凝剂的研究主要集中于分离筛选高效絮凝剂生产菌以及优化产絮凝剂的培养条件[4]。本研究从河南花田地表下10 cm采集土壤样品,采用平板分离和富集培养的方法得到1株高效的生物絮凝剂产生菌,并对该菌株进行分子鉴定和产絮凝剂条件优化,以期为微生物絮凝剂在工业化应用中提供一定的理论基础。
1 材料与方法
1.1实验样品和器材
1.1.1土壤样品
实验中所分离得到的菌种,均来自于河南花田地表下10cm土壤,土地由于长期用于花卉种植,因此土壤中富含大量各类菌种。将土壤样品采集后保存于4℃的冰箱中。
1.1.2实验药品及培养基
表1-1 实验药品列表
药品名称 纯度等级 生产厂家
酵母浸粉 分析纯 OXOID试剂有限公司
胰蛋白胨 分析纯 OXOID试剂有限公司
葡萄糖 分析纯 广东光华科技公司
蔗糖 分析纯 广东光华科技公司
蛋白胨 分析纯 安琪酵母公司
酸水解酪蛋白 分析纯 上海蓝季科技发展有限公司
甘露糖 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
无水乙酸钠 分析纯 南京化学试剂厂
麦芽糖 生化试剂 惠兴生化试剂有限公司
邻苯二甲酸 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
硝酸铵 分析纯 西陇化工股份有限公司
乙醇 分析纯 西陇化工股份有限公司
羧甲基纤维素钠 化学纯 国药集团化学试剂有限公司
硝酸钾 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
半乳糖 生化试剂 上海研域生物科技有限公司
尿素 分析纯 天津市大茂化学试剂厂
NaCl 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
实验过程中的主要培养基为LB培养基。LB培养基:调节 pH 在7左右,胰蛋白胨 10 g,NaCl 10 g,酵母浸粉5 g,蒸馏水500 mL。
实验组用来筛选菌种和富集培养所用的固体培养基,与液体培养基的材料基本一致,但都含琼脂约20%[5]。
1.1.3实验主要仪器和设备
表1-2 实验仪器与设备
仪器名称 型号 厂家
紫外可见分光光度计 多糖类生物絮凝剂功能菌的挖掘(3):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_78890.html