2  实验部分

2。1  材料、仪器与试剂

材料：2016年采摘于淮安淮阴师范学院

仪器：500克摇摆式高速万能粉碎机、LJG-18S冷冻干燥机（河南兄弟仪器设备有限公司）、超低温冰箱、T-214电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)、多用途恒温超声波提取机（上海比朗仪器有限公司）、旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）、紫外分光光度计（上海棱光技术有限公司）、数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）、高效薄层色谱板、薄层层析硅胶（青岛海洋化工有限公司）、精密pH试纸（中国镇江市化剂厂）、台式高速离心机 TGL-16D(常州海龙实验仪器有限公司)、电热鼓风干燥箱 GZX-9146MBE（上海博迅实验有限公司医疗设备厂）、玻璃点样毛细管（华西医科大学仪器厂生产）、高效液相色谱仪、核磁共振仪、质谱仪

试剂：无水乙醇、去离子水、蔗糖、葡萄糖、盐酸溶液、DPPH(1,1-二苯-2-苦肼基C18H12N5O6) (美国Sigma)均为分析纯；焦性没食子酸(邻苯三酚,C6H6O3)(天津市巴斯夫化工有限公司)、三羟甲基氨基甲烷、磷酸缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液、硫酸亚铁、CaCl2固体、BaCl2固体、KCl固体、NaCl固体、邻苯三酚、柠檬酸、磷酸氢二钠、水杨酸、30%过氧化氢、

2。2  色素的提取

2。2。1原料的预处理

将于新鲜采摘的火棘果实洗净晾干，脱除水分后将果实放入摇摆粉碎机中进行粉碎，待粉碎成细颗粒粉末时取出，装于干净的塑料袋中保存。

2。2。2确定最佳pH和最佳料液比

在正式试验前在不同pH和不同料液比下分别进行三次平行试验，比较吸光度值的大小，吸光度越大，提取率就越大，因此确定所需的最佳pH为2。5，最佳料液比为V火棘果粉末：V乙醇溶液=1:11。

2。2。3吸收波长的确定

以1:11的料液比，以85%pH2。5乙醇溶液，任取一个提取条件，将配置的固液混合物放入超声提取仪中进行色素的提取[5]。超声结束后，将烧杯取出，进行过滤，将过滤得到的滤液进行离心分离，选取转速为5500r/min，离心时间为20min。取出离心后得到的清液，即为超声所得的色素溶液。

取上述溶液用85% pH2。5乙醇溶液作为参比溶液，利用紫外可见分光光度计确定吸收波长。如下图1所示：

图1  乙醇提取物的紫外可见光谱图

由图1可见，于390nm和663nm处存在吸收峰。

2。2。4最佳提取条件的确定

本文采用超声辅助均匀设计应用于火棘果色素的提取，通过计算机软件EXCEL模拟出较佳提取工艺，并将优化条件进行实际应用。这一提取技术将为火棘果中色素的提取提供优化的技术工艺[6]。

本试验采用4因素6水平的均匀设计表考察的因素是超声提取功率（X1/w）、超声提取温度（X2/℃）、超声时间（X3/min）、乙醇浓度（X4/%）。针对这4个影响因素，每个因素安排6个水平。其取值范围分别为X1：50%~75%;  X2：15℃~35℃； X3: 15min~40min; X4:70%~95%。选定因素范围表和均匀设计表U6*(64)，如下表1和表2所示：

表1  因素范围表

因素 范围来自优I尔Q论T文D网WWw.YoueRw.com 加QQ7520~18766

乙醇浓度X1/% 70%~95%

超声功率X2/% 50%~75%

超声温度X3/℃ 15℃~40℃

超声时间X4/min 15min~40min

表2  U6*(64)均匀试验提取火棘果色素

    因素

水平 X1/％（浓度）