灵芝活性成分的提取富集工艺研究(3)
灵芝所含化学成分复杂，它所含的化学成分因所用菌种、培养方法、提取工艺的不同而变化。研究灵芝的化学成分的目的不仅在于了解和比较灵芝属不同品种及同一品种的不同发育阶段所含的化学成分的差异，还可以通过药理及临床研究确定其有效成分、有效部位和含量。研究表明，灵芝中除了含有三萜类化合物和多糖类化合物外，还含有甾醇类、核苷类、生物碱类、呋喃衍生物、氨基酸多肽类、无机元素和脂肪酸等化学成分，而灵芝三萜和灵芝多糖是灵芝中的主要的活性物质。
自1982年Kubota T[1]等人首次从灵芝的子实体中分离得到灵芝酸A ( ganoderic acid A ) 和灵芝酸B ( ganoderic acid B ) 这两种三萜类化合物以来，各国的学者都纷纷展开了对灵芝三萜类化合物的研究。迄今为止，已先后从灵芝的子实体、孢子粉和菌丝体中分到160[2]-[3]多种三萜类化合物。
到目前为止所发现的灵芝三萜类化合物均可分为四环三萜和五环三萜，其中灵芝四环三萜类化合物属于高度氧化的羊毛甾烷衍生物。按其分子所含的碳原子数分类，可将其分为C24，C27和C30三大类，按其所含功能团的不同和侧链的不同，可将其分为15种不同的基本骨架。而灵芝三萜类化合物的侧链有长有短，从2个至10个碳不等，如按其类型划分可分为24类。
1.2 灵芝三萜的药理活性研究概况
1.2.1 抗肿瘤作用
Lin等[4]从赤芝子实体中分离得到两个灵芝三萜化合物，分别为灵芝醛A和双氢灵芝醛A，体外抗肿瘤实验表明两者均有较强的抗肿瘤活性，它们对人肝肉瘤细胞和KB细胞的ED50值均在1~11 μg/mL以内，灵芝醛A的作用最强。Li[5]等用ganoderic acid X作用人肝肿瘤细胞HuH-7，发现它能抑制拓扑异构酶的活性，从而抑制DNA合成，并诱导肿瘤细胞凋亡。Min[6]等研究发现Lucidumol A、lucidumol B、ganodermanontiol、ganoderiol F和ganodermanondiol都对meth-A和LLC有抗细胞毒的活性，ganodermanondiol对meth-A的作用最强，ED50值为3.4 μg/mL；lucidumol A对LLC的作用最强，ED50值为2.3 μg/mL。
1.2.2 保肝作用
1987年Hirotani[7]等通过实验证明G. capense的灵芝酸提取物能增强肝的解毒作用，它能降低由CCl4引起的血清中得转氨酶水平的提高，能促进肝炎小鼠的肝再生，能增强小鼠抵抗毛地黄苷的作用，还能降低甘油三酯的合成量。G.lucidum 孢子粉的提取物也有上述作用，但相对较弱。
2000年王明宇[8]等从赤芝的子实体中分离得到粗组分GT，并进一步利用硅胶柱色谱得了5个组分(GT1-GT5)，经HPLC检测结果证实该GT和GT2中主要含有灵芝酸A和赤芝酸A。实验结果表明GT和GT2对由CCl4、氨基半乳糖苷或卡介苗+脂多糖导致的3种肝损伤模型小鼠的肝有较好的保护作用，它们还能明显的降低模型动物的血清ALT水平和肝脏中TG的含量，同时还能不同程度的减轻动物肝损伤。
1.2.3 抑制组胺释放的作用
Kohda等[9]报道ganoderic acid C和D能在体外对ConA诱导的大鼠肥大细胞释放组胺具有抑制作用，药物作用浓度在0.4 μg/mL时它们的抑制率分别为30%和15%。
1.2.4 抗菌消炎作用
李平作[10]等从灵芝深层发酵菌丝体中分离得到三种灵芝酸，其抗菌活性实验显示三种四环三萜酸具有抑制大肠杆菌、产气杆菌、肠炎杆菌、金黄色葡萄菌和枯草芽孢杆菌生长的活性。蔺丽[11]等从红芝中分离出溶菌酶及酸性蛋白酶，这两种酶都具有抗菌和消炎作用。
1.2.5 对心血管系统的调节作用
在降血压的活性方面，Morigiwa[12]等报道用Friedland和Silverstein法测定10个灵芝三萜化合物在体外对血管紧张素转化酶（ACE）的作用，结果发现ganoderic acid F对ACE有抑制作用，其IC50值为4.7×10-6 mol/L，另外9个化合物的IC50值在1×10-5~1×10-4 mol/L的范围内。
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