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灵芝活性成分的提取富集工艺研究(4)
另外灵芝还被报道有抑制胆固醇合成的作用。Komoda[13]等报道,将灵芝菌丝体加入到大鼠的高胆固醇饲料中,可显著地降低肝脏和血清中甘油三酯和胆固醇的含量,并指出其中的有效成分是三萜类化合物,主要是ganodermic acid S和R,它们可以小鼠对抑制食物中胆固醇的吸收。
目前的研究认为,灵芝中被氧化的三萜类化合物的结构与哺乳动物中胆固醇的生物合成途径中的羊毛甾醇中间体类似,它们能抑制胃肠道吸收食物里的胆固醇。这些氧化三萜类化合物还能抑制胆固醇合成过程中的限速酶(3-羟-3-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶)的活性,从而抑制胆固醇合成。
1.2.6 抗HIV-1及HIV-1蛋白酶的活性
Sahar等[14]从赤芝的子实体甲醇提取物中分离得到ganoderiol F和ganodermanontriol,它们能有效抑制由HIV-1诱导的MT-4细胞毒效应。笔者还认为具有 △7(8),△9(11)双键结构的羊毛甾烷型三萜类化合物与抗HIV-1活性密切相关。Min等[15]从赤芝的孢子粉中分离得到ganolucidic acid A、ganoderic acid β、lucidumol B、ganodermanontriol和ganodermanondiol,体外实验结果表明它们都对HIV-1蛋白酶活性有明显的抑制作用,另外,ganoderic acid A、B和 C也有中度的抑制作用。笔者还认为羊毛甾烷型母核C-3或C-24,C-25位上的羟基是其抗HIV-1蛋白酶活性的必需基团。
1.2.7 镇痛作用
Koyama等[16]报道从灵芝的子实体二氯甲烷提取物中分离得到了四个有镇痛活性的灵芝三萜类化合物ganoderic acids A,B,G和H,其中ganoderic acids H的镇痛效果最好。作者还对比分析了ganoderic acids H与compound C6的镇痛作用,并认为ganoderic acids H之所以作用强是因为C-12位上的羟基被乙酰化。
1.2.8 抑制血小板聚集的作用
Su等[17]报道了ganodermic acid S对TXA2拟似物U46619诱导的人源硅胶过滤处理的血小板聚集有明显的抑制作用,还可延迟血小板形态改变的时间,并减少血小板的初始聚集,降低其聚集的百分率,该抑制作用是剂量依赖型。
1.2.9 抗氧化作用
Zhu等[18]从赤芝水提取物中分离得到了含有三萜类成分的粗组分,观察到该粗组分对联苯三酚诱导的红细胞膜氧化及Fe(II)-抗坏血酸诱导的脂质过氧化反应的影响,受试物表现出剂量依赖性的抗氧化作用,证实粗组分的主要成分是ganoderic acid A,B,C,D,lucidenic acid B和ganodermanontriol。
1.2.10 抑制真核细胞DNA多聚酶活性
Mizushina等[19]从赤芝子实体中分离得到了两个新的三萜类化合物,lucidenic acid O和lucidenic lactone, 它们在体外都能选择性的抑制真核细胞DNA多聚酶的活性,并且对HIV-1反转录酶也有抑制作用,但它们对原核细胞DNA多聚酶和其它DNA代谢酶没有抑制作用。
研究表明,灵芝对很多疾病都具有良好的治疗效果,尤其是对肿瘤的预防和治疗作用,己经得到了大量的实验和临床结果的验证。但是对灵芝抗肿瘤的活性成分及其作用机理缺乏深入的研究,这都影响了灵芝产品进一步的开发和应用。
1.3 灵芝三萜类化合物的提取和分离
1.3.1 有机溶剂提取
利用有机溶剂从灵芝中提取三萜类化合物的方法大致可分为一下三类:
第一类是用有机溶剂提取原料,然后将所得的提取物直接进行分离。通常用来提取的有机溶剂为甲醇、乙醇、氯仿等, Konda H[20]等人先用甲醇提取,再将提取物浓缩悬浮于水,然后依次用己烷、乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯将其分部再分别用经硅胶柱层析、制备高效液相层析分离,共得到四个三萜酸类化合物。
第二类是先用有机溶剂提取,再分离出总酸部分,最后再进行柱层析分离。有机溶剂也是用甲醇、乙醇、氯仿等,例如,Nishitoba T[21]等人先用乙醇提取,再将提取物浓缩后悬浮于水和然后用氯仿萃取,当氯仿层浓缩到一定体积之后,再用饱和的NaHCO3水溶液萃取,得到的萃取物用6 mol/L HCl调pH值到 3-4,在水溶液中出现的沉淀先用氯仿溶解,然后干燥获得总酸提取物,在经硅胶柱层析分离后共得到五个灵芝三萜化合物。
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