摘要我们对国产孟加拉眼镜蛇毒液进行了全蛋白组构成分析，共发现了6个蛋白家族(三指毒素(3-FTx)，磷脂酶A2(PLA2)，神经生长因子，蛇毒金属蛋白酶(SVMP)，富半胱氨酸分泌蛋白和Ohanin蛋白)。孟加拉眼镜蛇毒液在小鼠体内表现出对小鼠的致死毒性(i。p。LD50:0。79μg/g)和肌肉毒素(CK:5939U/l),并显示在PLA2中有显著的酶活性，但在SVMP,L-氨基酸氧化酶或5’核苷酸酶中活跃性低。抗蛇毒评估显示，孟加拉眼镜蛇中一些毒液成分(约总毒液的17。5%)无法彻底被商业抗蛇毒血清免疫识别。Elisa分析显示，孟加拉眼镜蛇毒和舟山眼镜蛇毒对抗舟山眼镜蛇蛇毒血清的交叉反应没有差异。因此，使用商业舟山眼镜蛇抗蛇毒血清治疗孟加拉眼镜蛇咬伤是合理的，但对提高非免疫识别成分免疫反应关注的新型抗蛇毒血清设计是我们应该鼓励。88057

Abstract We conducted an omics-analysis of the venom of Naja kaouthia from China。 Proteomics analysis revealed six protein families [three-finger toxins (3-FTx), phospholipaseA2(PLA2), nerve growth factor，snake venom metalloproteinase(SVMP), cysteine-rich secretory protein and ohanin]。 N。 kaouthia venom expressed strong lethality (i。p。 LD50: 0。79 μg/g) and myotoxicity(CK: 5939 U/l) in mice, and showed notable activity in PLA2 but weak activity in SVMP, L-amino acid oxidase or 5′ nucleotidase。 Antivenomic assessment revealed that several venom components (nearly 17。5% of total venom) from N。 kaouthia could not be thoroughly immunocaptured by commercial Naja atra antivenom。 ELISA analysis revealed that there was no difference in the cross-reaction between N。 kaouthia and N。 atra venoms against the N。 atra antivenom。 The use of commercial N。 atra antivenom in treatment of snakebites caused by N。 kaouthia is reasonable, but design of novel antivenom with the attention on enhancing the immune response of non-immunocaptured components should be encouraged。

毕业论文关键词：孟加拉眼镜蛇；毒液；酶活性；毒理活性；抗氧化剂源-于,优W尔Y论L文.网wwW.youeRw.com 原文+QQ75201,8766

Keyword: Naja kaouthia；Venomics；Enzymatic activity；Toxicological activity；

Antivenomics

目    录

摘要2

Abstract 。2

关键词2

Keyword 2

一、引言4

二、材料与方法4

(一)蛇毒和抗蛇毒血清。4

(二)蛇毒蛋白的分离与鉴定。4

(三)抗蛇毒分析。6

(四)酶联免疫测定。6

(五)酶活性和毒理活性。6

       1、致死性。6From~优E尔L论E文W网wWw.YoUeRw.com 加QQ7520.18766

2、肌肉毒性。6

3、蛋白水解酶活性。6

4、L-氨基酸氧化酶的活性。6

5、5′- 核苷酸酶活性7

6、磷脂酶A2活性7

7、统计分析。7

三、结果与讨论。7

(一)蛇毒蛋白质组学。7

(二)孟加拉眼镜蛇毒液的毒性及酶活性。7

(三)商业抗蛇毒血清对毒液的抗蛇毒评价和ELISA评价 。10

四、参考文献。11

一、 引言

高等蛇毒液的进化使他们的捕食方式有了从机械(收缩)到化学(毒液)的转变，并在蛇种类的多样化中发挥了重要的作用[1]。在进化过程之前或贯穿整个进化过程中的新毒素基因的补充或现有毒素基因的爆发性多样化都导致了蛇毒液的变化[2,3]。自然选择推动了毒素的快速进化[4,5]。一般来说，功能作用的复杂性与毒液组成和丰度的变化密切相关[6–9]，因此研究毒素组学和蛋白组学有助于毒蛇咬伤的临床治疗，药用成分的筛选以及抗蛇毒血清制备。论文网