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不同氮素水平对盐胁迫下菘蓝种子萌发和幼苗生长的影响(3)
营养液的配置:营养液均以1/4 Hoagland配制,大量元素(mmol•L-1)配方为:KNO3 1.25、Ca(NO3)2 1.25、KH2PO4 0.25、MgSO4 0.5。微量元素和铁元素配方参考Zheng等[7]
的配方,微量元素浓度(mg•L-1)分别为H3BO3 2.860,MnSO4•H2O 1.136,CuSO4•5H2O 0.079,ZnSO4•7H2O 0.220,H2MoO4 0.098,以KNO3作为额外的氮源。
1.3 测定指标及方法
1.3.1 种子发芽指标的测定 从开始培养起每天记录种子发芽数,将发芽的标准定义为胚轴长度等于种子长度[8]。发芽率(GR)= ∑Gt/T×100%;发芽势为第3天种子萌发数与供试种子数百分比;发芽指数( GI) = ∑( Gt/Tt)(Gt 为t天内的发芽数,Tt 为对应 Gt的发芽天数);活力指数( VI) = GI ×苗高,苗高为种子萌发后第7天幼苗高度[9]。
1.3.2 幼苗生长指标和生物量的测定 每个产地各组处理分别随机选取10株菘蓝幼苗测量其苗高、根长、10株苗鲜重、10株根鲜重,每个处理3次重复。
1.3.3 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 采用氮蓝四唑(NBT)法测定菘蓝幼苗中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,各处理3次重复[10]。
1.3.4 丙二醛(MDA)含量的测定 采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定菘蓝幼苗中MDA的含量,各处理3次重复[10]。
1.3.5 可溶性蛋白含量的测定 采用南京建成生物研究所试剂盒A045-2的考马斯亮蓝法测定菘蓝幼苗中可溶性蛋白含量,各处理3次重复。
1.3.6 脯氨酸含量的测定 选取不同处理组菘蓝幼苗各0.5 g,加入5 ml的3%磺基水杨酸,沸水浴10 min,冷却,过滤,滤液即为脯氨酸提取液;吸取2 ml提取液,另加2 ml冰醋酸及2 ml酸性茚三酮试剂,震荡摇匀,保鲜膜封口,沸水浴30 min;冷却,加入4 ml甲苯摇荡30 s,静置,取上层溶液于比色皿中,以甲苯为对照,测定520 nm处的OD值。各处理3次重复[10]。
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