1、实验的材料与方法

1。1实验材料

1。1。1、中国石龙子：

研究所用的中国石龙子均在2016年3月到4月，也就是石龙子结束冬眠，即将进入交配期的精子发生旺盛期获得，分别是三月中旬，三月底以及4月中旬各进行一次，得到处于不同精子发生时期的个体，将每次抓捕的石龙子带回实验室，鉴定性别，测体重，测体长，取体长大于等于100的雄性个体进行断头取精巢操作。文献综述

1。1。2、实验试剂：

4%多聚甲醛（用于固定）

0。5 mol/L的蔗糖溶液

OCT包埋剂

PBS溶液（用于复水）

6% BSA（封闭剂）

抗a-微管蛋白单克隆抗体结合异硫氰酸荧光素(monoelon anti-α-tubulin conjugateclone DMIA- FITC)：浓度1 ：200，用6% BSA稀释

TBST缓冲溶液(20 mmol/L Tris，pH7。5，154 mmol/L NaCl，2mmol/L EGTA ，2mmol/L MgC12，0。1% TritonX-100)

细胞核荧光染色液4,6-二脒基-2-苯基吲哚（4，, 6-diamidino-2-phenylindole，DAPI )

抗荧光碎灭剂

1。1。3、实验用具：

锡纸盒、冰箱、冰冻切片机、培养皿、激光共聚焦显微镜等。