摘  要 胰岛因子（Islet1，Isl1）属于LIM同源框基因家族，其氨基酸排列序列在啮齿类动物和人中存在高度保守，在结构上具有一个同源结构域和两个串联的LIM结构域。在许多器官和组织的发育过程中和出生后都对细胞起着促进增殖的作用。在胚胎的发育阶段，Isl1受到多种上游信号通路的调节，对心脏和胰腺的形成、运动神经元的分化具有重要影响，与糖尿病的产生以及多种肿瘤有关。90100

       本实验通过Cre-LoxP重组酶系统在小鼠基因打靶中的应用，敲除2月龄即成年小鼠的Isl1基因，小鼠表现出糖尿病症状。通过对出生7天小鼠做基因型鉴定，鉴别出Isl1突变体，以便于后续研究。

    Islet factor belong to the LIM homeobox gene family, its amino acid sequence in rodents and highly conservative, on the structure has two series of LIM structure and a homologous structure domains。In the process of the development of many tissues and organs and all play a promoting role of cell proliferation after birth。During embryonic development, Isl1 Wnt/beta - catenin, FGF, BMP upstream regulation of signaling pathways, such as, heart, and pancreas of motor neuron differentiation has important influence on the formation of;After birth, Isl1 tag a group of neurons and cardiac progenitor cells with proliferation differentiation ability, and is associated with the occurrence of diabetes as well as a wide variety of tumor。

This experiment through the Cre - LoxP recombination enzyme system in the application of gene targeting in mice, knock out 2 months namely Isl1 gene of adult mice, Genotyping of 7-day-old mice was performed to identify Isl1 mutants for subsequent study。

毕业论文关键词：Isl1转基因小鼠; Cre-LoxP重组酶系统; PCR基因鉴定

Key words: Isl1 Transgenic mice; Cre-LoxP recombination enzyme system;  Gene identification of PCR 

目录

摘  要 II

引言 5

1。1 Isl1基因源Q于W优E尔A论S文R网wwW.yOueRw.com 原文+QQ75201,8766 简介 5

1。2因敲除原理 5

1。3实验流程 6

实验材料与方法 6

2。1实验材料 6

2。1。1实验试剂 6

2。1。2实验仪器 7

2。2 实验方法 7

2。2。1小鼠特性 7

2。2。1。1鼠的特点 7

2。2。1。2小鼠基本操作技术 8

2。2。2 小鼠饲养 8

2。2。3 样品采集 9

2。2。4 小鼠DNA的提取 9

2。2。5  Thermo ND2000C测量DNA浓度 10

2。2。6引物设计 11

2。2。7 小鼠DNA的PCR扩增 12

2。2。8 琼脂糖TAE凝胶电泳分离PCR产物 14

2。2。9目的片段测序 14

实验结果分析 15

总结与展望 20

参考文献 21

致  谢 23

附 录 24

引言