毕业论文关键词： ISL2基因；基因敲除；PCR扩增技术   源Q于W优H尔J论K文M网WwW.youeRw.com 原文+QQ75201.,8766

Key words: ISL2 gene；Gene knockout；PCR amplification；

目  录

1引言 5

1。1背景介绍 5

1。1。1人类神经系统 5

1。1。2神经系统的组成 6

1。1。3神经系统的基本结构 6

1。1。4神经元（神经细胞） 6

1。2 基因敲除原理 6

1。4神经系统主要功能 8

2实验材料 8

2。1实验仪器 8

2。2 实验试剂 9

3实验方法 10

3。1 小鼠特性与实验规范 10

3。1。1 小鼠的特点 10

3。1。1。1 生物学特性 10

3。1。2 饲养管理要求 11

3。1。3 小鼠基本操作技术 11

3。1。3。1 实验动物标记编号的方法： 11

3。1。3。2 小鼠的抓取固定 11

3。1。3。3 安乐死的方法 12

3。2 DNA采集与提取 12

3。2。1 DNA采集 12

3。2。2 DNA提取 12

3。3引物设计 13

3。4聚合酶链式来自优W尔Y论W文C网WWw.YoueRw.com 加QQ7520,18766 反应（PCR 13

3。4。1 PCR步骤 14

3。4。2 PCR反应体系（30ul） 16

3。5 琼脂糖凝胶电泳 16

4实验结果 17

4。1琼脂糖凝胶电泳成像分析 17

参考文献 18

致    谢 19

1引言

1。1背景介绍

    基因敲除在近几年来生命科学领域具有重要进展。 目前基因敲除动物已在生物医学研究的许多领域取得应用。Isl2 基因被敲除的小鼠是利用 Loxp 的方法，是将正常的实验小鼠的Isl2 基因进行基因敲除。 经过繁殖和筛选后获得的一种具有神经系统表达缺陷的一种小鼠。由于已知被IsI2基因敲除小鼠是具有神经系统表达缺陷的特征的。 所以这种小鼠是我们研究人体神经系统发育功能等的理想实验动物 。但是由于需要进行基因型鉴定的动物数量太多, 工作量较太大，由于传统的Southern blot 方法不仅费时而且昂贵。同时又涉及同位素还可能会对环境造成污染, 不便于进行大规模的动物基因型的筛选。因此我们通过聚合酶链反应(polymerase  chain reaction , PCR)技术对其进行分析Isl2基因敲除小鼠的基因型。 主要是为了研究Isl2 基因敲除小鼠的神经系统的发育情况，从而得到此次实验所要研究的目的 。

1。1。1人类神经系统论文网

神经系统对于人体的结构与功能是十分复杂的，体内各器官与系统之间在功能和各种生理过程中并非独立自主地在进行生命活动的，它是在神经系统的直接或间接的调节、协调和控制下进行的，它们之间是彼此相互联系、影响并且密切配合的，从而使人体成为一个完整的生命有机体，用来维持人体正常的生命活动和其他各种活动。