由于我国DNA检验所使用的试剂一直依赖进口,巨额的经费支出成为制约了国内DNA检验工作发展的其中一个重要因素,国内DNA检验工作的规模化发展和数据库的建设也受到了严重的制约影响。因此,开展专项自主研发DNA检验试剂,是化被动为主动从而摆脱对国外产品依赖的唯一出路。
开展专项自主研发DNA检验试剂作为国家“十五”科技攻关计划项目,科研人员展开了攻关研究工作。在不到三年时间里,课题组的科研同志先后攻克十多项关键技术,并最终研制成功稳定可靠并符合法医DNA检验要求、包含15个基因位点的DNA试剂盒。经过各方专家鉴定,研发出的DNA试剂盒各项性能指标均达到了国际先进水平。如今,国产DNA试剂已累计生产700万人份,被广泛应用于全国近百家DNA机构实验室。经过实践证明,国产DNA试剂可用于我国的DNA检验工作和数据库建设中发光发热。
“十一五”期间,我国的法医DNA技术经过二十年的磨砺,已经得到了全面发展。以荧光STR复合扩增检测为主的法医DNA技术在检验能力和水平上获得了空前盛况。“十一五”期间法医DNA领域突飞猛进的发展,研究出的一系列的成果在“十二五”期间得以应用和普及推广。新的遗传标记和检测技术也开始应用研究中:(1)SNP种族推断技术[18]。STR(短串联重复序列)复合扩增是目前法医DNA个体识别的常规方法,更多地局限于“比对”作用。由于我国人口基数极大,DNA数据库的数据量不足总人数的3%,因此比中率难以满足现实的需求。而通过Y-STR检验可以进行嫌疑对象家族体系的排查和锁定,但这种方法只适用于常驻人员相对稳定的农村或是偏远地区。如果没有比对成功,案件的侦破就容易陷入被动甚至是困境。SNP(单核苷酸多态性)广泛分布在基因组的编码区和非编码区,包含着大量的与人的种族、特征等相关联的信息。国家公安部物证鉴定中心自2009年就开始进行法医DNA来源人种族推断的研究,“十二五”期间首次建立了SNP种族推断技术平台[19],研究成功非洲、东亚、欧洲三大人种及其混合人种推断技术体系,并开始运用于涉外反恐反暴力等案件的检验鉴定工作当中。(2)现场生物斑迹组织来源鉴定技术[20]。现场生物斑迹的组织来源检验鉴定可以为案件现场的重现和案件定罪量刑提供重要讯息。过去传统的血清生化方法无法应用于微量生物检材检验。经科研人员研究发现mRNA、microRNA、甲基化等遗传标记在不同组织中存在差异。“十二五”期间,国家公安部物证鉴定中心研究建立了一种mRNA组织来源鉴定体系,可以区分阴道分泌物、精斑、外部血、月经血和唾液等。(3)下一代DNA测序技术[21]。随着新一代DNA测序技术的出现,法医DNA领域迎来了新的发展契机,其高通量的优势是传统毛细管测序技术无可比拟的,有可能从微量的生物检材中寻找出更多案件所需要的遗传信息和个体有效身份信息。
2。2 DNA检验技术的现状文献综述
DNA检测技术的应用,给法医学界带来了一场技术。十几年来,经由对遗传物质DNA的序列多态性及长度多态性的检验,可以实现个体识别和亲权鉴定纠纷,这项技术正在成为当前法医物证鉴定中最主要的技术手段。法医DNA技术经历了多位点DNA指纹图技术、扩增片段长度多态性分析技术、线粒体DNA 测序技术这三大技术,已经发展到目前以荧光标记多基因座STR复合扩增检测技术和线粒体DNA 测序技术为主导分析技术的阶段。现如今法医物证鉴定中DNA分析所采用的主要技术方法包括:STR分析技术、线粒体DNA序列分析技术和以PCR技术为基础的其他DNA分析方法[22]。