新分离H9N2亚型禽流感HA、NA基因的测序分析及其免疫学实验研究(3)
1材料和方法
1.1实验仪器和材料
1.1.1载体、菌株、分子克隆试剂及试剂盒
pMD-18T TaKaRa公司
pET28a TaKaRa公司
pET32a TaKaRa公司
大肠杆菌DH5α 实验室常规保存
rTaqDNA聚合酶 TaKaRa公司
T4连接酶 TaKaRa公司
内切酶BamHⅠ TaKaRa公司
内切酶HindⅢ TaKaRa公司
DNA Ladder2000 TaKaRa公司
DNA ladder15000 TaKaRa公司
DNA Gel-extraction Kit TaKaRa公司
Plasmid Mini Extraction Kit TaKaRa公司
RR047A逆转录试剂盒 TaKaRa公司
引物合成 金斯瑞公司
1.1.2主要试剂及器材
FBS Invitrogen
RIZOL 试剂 Invitrogen
二巯基乙醇 碧云天公司
30%聚丙烯酰胺溶液 上海星科生物公司
Tris-HCL缓冲液(1M，pH6.8) 上海星科生物公司
Tris-HCL缓冲液(1M，pH8.8) 上海星科生物公司
10%SDS溶液 上海星科生物公司
一次性平皿 康宁
15ml离心管 康宁