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葡萄果实渣中提取多酚及其抗氧化性分析(3)
1.2.2 多酚总含量的测定
(1)试剂和溶液:酒石酸亚铁溶液:首先称取1g (精确至0.000019)硫酸亚铁和5g(精确至0.00001g)酒石酸钾钠。然后用水将两者溶解,并定容至1L,需要注意的是溶液要在避光低温的环境之下保存。
PH7.5磷酸盐缓冲液:
1/15 mol/L磷酸氢二钠:称取23.3779磷酸氢二钠,然后加水,将磷酸氢二钠溶解,再定容至1L。
1/15 mol/L磷酸二氢钾:称取0.90789磷酸二氢钾,然后加水,将磷酸二氢钾溶解后,再定容至1L。分别取1/15 mol/L磷酸氢二钠85mL和1/15 mol/L磷酸二氢钾15 mL混合均匀。
(2) 测定:吸取l mL试液,将其转移至25 mL容量瓶中。加蒸馏水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL,充分混合,再加pH 7.5的缓冲溶液至刻度,用10mm比色杯,在波长540 nm处,以试剂空白溶液作参比,测吸光度A。
(3) 标准曲线的制作:配制5.0 g/L没食子酸标准液:准确称取0.5g没食子酸标准样品,加蒸馏水溶解后移入100 mL容量瓶中进行定容。其中6只100 mL容量瓶中分别加入5.0 g/L没食子酸标准样品0,l,2,3,5,10 mL,加入蒸馏水定容至100 mL,各吸取1 mL方法测定,绘制标准曲线y=1.8206x+0.0039。
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