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可磁分离的BiFeO3AgI对大肠杆菌的杀灭效应(2)
1.实验部分
1.1 样品的制备和表征
1.1.1 样品的制备
在约 25 ℃的室温条件下,按体积比无水乙醇:冰醋酸=1:1 配制好混合溶剂, 将2.0201 g Fe(NO3)3•9H2O溶解在100.0 mL混合溶剂中得到 0.050 mol/L 的Fe(NO3)3溶液,将2.4254 g Bi(NO3)3•5H3O 溶解在100.0 mL混合溶剂中得到0.050 mol/L的Bi(NO3)3 溶液。在快速搅拌下,将Fe(NO3)3溶液滴入到 Bi(NO3)3溶液中,然后用0.050 mol/L的NaOH 溶液调节体系pH=4.5,得到暗红色、稳定的前驱体溶液。将前驱体溶液用保鲜膜密封好后放至 80 ℃的烘箱中,让前驱体溶液缓慢反应得到溶胶,经约 70 h 陈化、干燥后得到干凝胶。将干凝胶在马弗炉中 600 ℃煅烧 1 h(N2气氛保护),自然冷至室温,取出样品在研钵中研磨30 min得到实验样品BiFeO3粉体。
1.1.2 样品的表征
通过D8 ADVANCE 型X-射线粉末衍射(XRD)仪(德国布鲁克公司)测定制备的BiFeO3的结构特征。实验条件:Cu:Ka为辐射源;管电压:40 kV;管电流:40 mA;扫描速度:3°/min;分析范围:5°-70°。
通过Quanta200型扫描电子显微镜(SEM)对制备的BiFeO3/AgI样品进行形貌观察。
1.2 试剂和仪器
1.2.1 实验材料
光催化剂:溶胶凝胶法制备的BiFeO3/AgI样品
菌种:大肠杆菌菌种(E.coli ATCC2952第四代)
1.2.2 主要的仪器和设备
名称 型号 厂商
电热恒温水浴锅 型号SY 北京泰克仪器有限公司
恒温加热磁力搅拌器 型号CL4型 巩义市英峪予华仪器厂
电子天平 型号AL204 梅特勒-托利多仪器有限公司
光照培养箱 型号GX2智能型 宁波市新江南仪器有限公司
电热鼓风干燥箱 型号DGF30/14-ⅡA 南京实验仪器厂
立式压力蒸汽灭菌器 型号LDZX-50KB 上海申安医疗器械厂
洁净工作台 型号SW-CJ-2FD 苏净集团安泰空气技术公司
恒温振荡器 型号HZQ-X300 河南致达电子有限公司
冰箱 型号BCD-215KCM 青岛海尔股份有限公司
锥形瓶;烧杯;量筒;玻璃棒;容量瓶;试管;培养皿;移液管;移液枪。
1.3 实验方法
1.3.1 培养基的制备与灭菌
1. 培养基配方:
表1 LB液体培养基
酵母膏 蛋白胨 氯化钠 蒸馏水
5g 10g 10g 1000ml
表2 LB固体培养基
酵母膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 蒸馏水
5g 10g 10g 17.5g 1000ml
2. 灭菌:利用立式压力蒸汽灭菌器将所用器皿和药品在121oC灭菌30min。1.3.2 菌种活化与大肠杆菌悬浮液的制备
菌悬液制备之前需要进行活化处理:取保存的大肠杆菌 E.coli ATCC2952第四代的菌种管在无菌操作下打开,把灭菌的接种环伸入菌种试管,先将接种环接触试管内壁,使接种环的温度下降达到冷却的目的,然后再挑取少许菌苔,接种环从菌种试管中抽出,迅速伸入事先准备好的倒有固体培养基的试管中,将挑取的菌苔接种到斜面上,放置于37oC±1 oC培养箱内培养24小时,进行活化。然后用无菌生理盐水将斜面上活化后的大肠杆菌冲洗到灭过菌的盛有液体培养基的三角瓶内,放入37oC,170r/min恒温振荡器内震荡培养24h。
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