摘要：该实验在单因素条件下对重组马克斯克鲁维酵母产纤维素酶的液体培养基进行优化，主要改变培养基的碳源，氮源，生物素浓度和初始pH值使重组马克斯克鲁维酵母产纤维素酶酶活达到最优。通过滤纸酶活测定纤维素酶活力得到在20 g/L α-乳糖，20 g/L 乙酰胺，150 mg/L生物素，用柠檬酸缓冲溶液（0.05 M、 pH 4.8）配制并调节到7.0的培养条件下产出的纤维素酶酶活力最高。66471

毕业论文关键词：马克斯克鲁维酵母，纤维素酶，培养条件优化

Abstract: The experiment under single factor recombinant Kluyveromyces marxianus broth cellulase production optimization,the main changes in carbon, nitrogen, biotin concentration and initial pH value of the medium of the recombinant Kluyveromyces marxianus produce cellulase activity reached optimum. Cellulase activity obtained at 20 g / L α- lactose, 20 g / L acetamide, 150 mg /L, formulated with citric acid buffer solution (0.05 M, pH 4.8) and adjusted to the culture conditions 7.0 Determination by filter paper activity under highest output of cellulase enzyme activity.

Keywords：Kluyveromyces marxianus，Cellulase，Optimization of culture conditions

目录

1 前言 6

2 实验材料 6

2.1 菌种 6

2.2 培养基与试剂 6

2.3 主要仪器与设备 6

3 实验方法 7

3.1 初始pH值优化 7

3.2 培养基碳源优化 7

3.3 培养基氮源优化 7

3.4 生物素浓度优化 7

3.5 重组菌酶活测定 8

4 结果与讨论 8

4.1初始pH值优化 8

4.2 YPG培养基碳源优化 8

4.3 YPG培养基氮源优化 9

4.4 生物素浓度优化 10

4.5最佳产酶条件优化结果 11

结论 12

参考文献 13

致谢 14

1  前言

在矿物质能源紧缺的今天，除了节约能源和寻找替代资源外，更应该可持续的利用有限的资源。生物能源恰好是人类最主要的可再生能源之一，能通过生物的活动，将生物质、水或其他无机物转化为沼气、氢气等可燃气体或乙醇、油脂类可燃液体为载体的可再生能源。那么，如何更好地利用生物能源成为关键性的问题。生物能源利用最主要的问题就是纤维素的降解。为了更好的利用纤维素，则需要大量的纤维素酶，但是纤维素酶的应用成本相对较高[1-2]，如何开发低成本的纤维素酶仍在探索中。本实验的目的就是想通过优化重组马克斯克鲁维酵母产纤维素酶培养条件来找到该菌株的最佳产酶条件，从而为后期的大规模生产纤维素酶奠定基础。文献综述

纤维素酶是降解产生纤维素的一组酶的总称，能降解和利用纤维素的微生物大致可分为真菌类和细菌类。 纤维素酶包括内切葡聚酶（EG）、外切葡聚酶（CBH）和 β -葡萄糖苷 酶（BG）三种酶 [3-4]。木质纤维素中纤维素主要以结晶状态存在，而外切葡聚糖酶是唯一对结晶纤维素起作用的纤维素酶，在木质纤维素降解成还原糖的过程中，外切葡聚糖酶起着非常关键的作用[5]。