摘要：该试验利用重组后的马克斯克鲁维酵母菌株液体发酵培养生产β-葡萄糖苷酶，为探究不同的发酵条件对重组马克斯克鲁维酵母产β-葡萄糖苷酶的活性的影响，采用单因素法进行实验，优化了接种量、碳源、碳源浓度、氮源、氮源浓度、pH、时间等发酵条件，最后确定其最优发酵条件为：5%（w/v）的稻草粉为碳源，5%（w/v）的酵母粉为氮源，pH为5。0，发酵时间为5天，接种量为2%（w/v），接入装有50 ml液体发酵培养基的250 ml锥形瓶中，30℃、150 r/min震荡培养，最终此条件下重组马克斯克鲁维酵母产β-葡萄糖苷酶的酶活为11。0772 U/ml*min-1。77621

毕业论文关键词：单因素法，重组马克斯克鲁维酵母，β-葡萄糖苷酶，液体发酵培养，条件优化

Abstract：The experiment uses the restructuring Kluyveromyces marxianus to ferment product β-glycosidase enzymes。 Using single factor method to experiment to explore different fermentation conditions on the restructuring Kluyveromyces marxianus to product β-glycosidase enzymes。 It optimized the inoculation quantity, concentration of carbon source, carbon source, nitrogen source, nitrogen source concentration, pH, time and so on fermentation condition。 Finally ,the optimal fermentation conditions are: 5% (w/v)of straw powder as the carbon source, 5% (w/v) of the yeast powder as nitrogen source, pH 5。0, fermentation time is 5 days, inoculated quantity is 2% (w/v)。Culturing bacteria access with 50 ml liquid fermentation medium in the 250 ml conical flask, 30℃, and 150 r/min shaking culture。 Finally, the enzyme activity of β-glycosidase enzymes producted by the restructuring Kluyveromyces marxianus is 11。0772 U/ml*min-1 under this condition。

Keywords：single factor method，restructuring Kluyveromyces marxianus，β-glycosidase enzymes， liquid fermentation culture，conditions optimization

目录

1  前言 4

1。1  β-葡萄糖苷酶概述 4

1。2  重组马克斯克鲁维酵母概述 4

1。3  课题目的 4

2  实验材料与方法 5

2。1  菌种 5

2。2  培养基 5

2。2。1  种子培养基 5

2。2。2  发酵产酶培养基 5

2。3  主要仪器和试剂 5

2。3。1  仪器 6

2。3。2  试剂 6

2。4  实验方法 6

2。4。1  菌种扩大培养 6

2。4。2  发酵产酶培养 6

2。4。3  粗酶液制备 6

2。4。4  酶活测定 6

2。4。4。1  酶活测定原理 6

2。4。4。2  酶活测定操作步骤 7

2。5  发酵条件的优化 7

2。5。1  接种量优化 7

2。5。2  碳源优化 7

2。5。3  碳源浓度优化 7

2。5。4  氮源优化 8