摘要：随着转基因技术的发展，转基因作物逐渐走向市场，而其生物安全性也受到了广泛关注，因此世界各国根据不同的作物，颁布了一系列的转基因安全检测标准，本研究根据国家发布的转基因安全检测标准，以冬小麦为实验材料，利用CTAB法抽提其基因组总DNA，分别采用普通PCR和荧光定量PCR，对待测样品中是否含有常用的启动子外源基因CaMV35s进行分子鉴定，来判断待测样品是否为转基因产品。77620

毕业论文关键词：冬小麦，外源基因， PCR技术

Abstract: With the development of transgenic technology, transgenic crops gradually toward to the market, and the biological safety has been widespread concern, therefore, many countries depending on the crop, issued a series of transgenic safety testing standards。 In this study, according to the existing GM safety inspection issued by the national standard, winter wheat as experimental material, genomic DNA of wheat products was extracted by CTAB method。 we use qualitative and quantitative PCR respectively to determine whether the sample contained target gene CaMV35s。

Keywords: winter wheat, foreign gene, PCR

目录

1前言 4

2 材料与方法 4

2。1 材料 4

2。2 试剂与耗材 5

2。3 仪器设备 5

2。4 方法 5

2。4。1 DNA的提取与纯化 5

2。4。2引物和探针序列 5

2。4。3 PCR检测 6

3结果分析 8

3。1 DNA提取结果 8

3。2定性PCR检测 8

3。3荧光定量PCR检测 9

结论 11

参考文献 12

致谢 13

1前言

随着转基因产品市场的不断发展，转基因产品的安全引起世界范围内的广泛关注[1]。转基因生物（Genetically Modified Organism, 简称GMO）是通过现代生物技术，在特定的生物体内导入目标基因片段，从而使受体生物获得某种特定性状[2,3]。这种直接作为食品或以其为原料加工的食品称为转基因食品[4]。转基因食品以其良好的抗逆性或高产功能等优点，能够提高人类农产品的品质，并为人类解决未来食物短缺问题提供了有效手段[5]。论文网

在GMO商业化进程中，创造转基因农产品的技术并不是很准确。在创造转基因农产品的操作过程当中，多个拷贝外源基因被随机地插入原有的基因组中，造成原有基因的缺失或重排[6,7]。转基因农产品是否有毒性或致敏性，严重涉及到食品的安全、人类的健康以及生态环境的稳定等重大问题，对此我们不得不引起高度重视。

作为人类的重要谷类作物，小麦在人类食品以及动物饲料中占有重要地位[8,9]。转基因小麦是否安全，直接影响着人类的健康，因此，对转基因小麦及其产品的检测是尤为重要。为了保障人类健康和动植物的安全，维持生态环境的稳定，应该加强对转基因农产品安全的监管，科学的对转基因农产品建立快速有效的检测方法[10-12]，这是人类和动物维持可持续发展的重要保证。

 PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称[13]。是利用核酸复制酶、引物和核酸单体组成元件，在体外完成模板DNA的复制。PCR技术有灵敏度高、快速、准确、重复性好、特异性强等优点[14]。基于PCR方法的检测，能够判断待测样品中是否含有目的外源基因[15]。