1.2.1.3 不同水杨酸浓度处理

用天平分别称取0.1g、0.15g、0.2g水杨酸于1号、2号、3号烧杯中，分别加少量无水乙醇溶解，再加蒸馏水至1L后，用玻璃棒搅拌均匀，先配成0.1 g/L，0.15 g/L，0.2 g/L的水杨酸溶液。再将充分成熟，无其他损伤和病虫感染的大小一致的常山胡柚鲜果分别放入0.1 g/L，0.15 g/L，0.2 g/L的水杨酸溶液以及蒸馏水中浸泡20 min。浸泡后，将常山胡柚取出用透明保鲜膜包裹1层或者不包裹，分组置于托盘上，放入24±2℃温室中贮藏。之后每天记录胡柚鲜果的保鲜情况，拍摄照片。

1.2.1.4 不同一甲基环丙烯（1-MCP）浓度处理

先用天平称取3份0.1克的1-MCP粉剂(粉剂的一甲基环丙烯的含量为3.3%)分别放入密封的干燥器（体积5 L）中，在容器内加入1 mL、10 mL、100 mL的纯水，快速搅拌使其溶解，即稀释了10、100、1000倍。将其编号为1、2、3。再将充分成熟，无其他损伤和病虫感染的大小一致的常山胡柚鲜果分为4组，每组3个：分别放入1、2、3容器内放置24小时和做对照（不进行处理）。待24小时后，将常山胡柚取出用透明保鲜膜包裹1层或者不包裹，分组置于托盘上，放入24±2℃温室中贮藏。之后每天记录胡柚鲜果的保鲜情况，拍摄照片。

1.2.2 储藏期生理指标测定

1.2.2.1 果实处理

取自然放置3个月左右的胡柚鲜果，大小和成熟程度一致的常山胡柚12个,平均分成4组，每组3个，分别置于0.15 g/L水杨酸溶液，0.01%高锰酸钾溶液，1%氯化钙溶液和纯水中浸泡20分钟，取出后分别用保鲜膜包裹，置于24±2℃温室中贮藏。

1.2.2.2 酶液提取

A:以5天为一个间隔周期，每隔5天分别从上述处理过的胡柚上称取0.5克胡柚的果皮，加入2 mL 0.05 mol/L的PBS缓冲液，研磨成匀浆。将匀浆转移到2 mL的离心管中，在4000 r/min下离心15 min，所得的上清液即为酶粗提液。

B:以5天为一间隔周期，每隔5天，分别在上述处理过的胡柚上割取0.3克胡柚的果皮于研钵中，加入2mL 0.05mol/L，pH7.0的PBS缓冲液，研磨成匀浆。将匀浆转移到2 mL的离心管中，4000 r/min下离心15 min，所得的上清液即为酶粗提液。来.自>优:尔论`文/网www.youerw.com

1.2.2.3 丙二醛（MDA）含量的测定

利用MDA试剂盒制备标准曲线，并用A方法提取的酶液进行MDA含量的测定（操作按照试剂盒说明书进行）。

1.2.2.4 超氧化物歧化酶（SOD）活性测定

利用SOD试剂盒制备标准曲线，并用A方法提取的酶液进行SOD酶活性的测定（操作按照试剂盒说明书进行）。

1.2.2.5 过氧化物酶（POD）活性测定

利用POD试剂盒制备标准曲线，并用A方法提取的酶液进行POD酶活性的测定（操作按照试剂盒说明书进行）。

1.2.2.6 过氧化氢酶（CAT）活性测定

取一支干净的试管，在试管中加入2800μL PBS（25 mmol/L, pH7.0, + 2 mmol/L 

EDTA）和100μL酶液（B方法提取），轻轻摇匀后加入100μL H2O2，快速振荡后迅速转入比色皿，利用紫外光分光光度计，采用A240动力学方法测定，取15-45S曲线斜率作为其活性。计算公式：测量值/m（样品）×E（mM/cm）（E=2.8 mM/cm）。