5

2.2常山胡柚幼茎培养结果 7

2.3常山胡柚幼胚培养结果 8

3  讨论 11

参考文献 12

致谢 13

引言

常山胡柚(Citrus changshan-huyou Y. B. Chang, sp. Nov)是中国柑橘属的一个新种,为原产于浙江常山县的特有杂柑类良种[1]。在3月下旬开始发芽,4月初会出现花蕾,开花期从4月下旬开始,持续至5月上旬,在5月中上旬基本完成生理落果,持续时间约1周,到6月底基本进入定果期。一般到11月上中旬成熟采收。其果实饱满,外观呈鲜黄色,香味浓郁,果粒呈金黄色,汁液饱满,味道酸甜适中,微甘[2]。不仅口感良好,常山胡柚还含有人体所必需的6种氨基酸及多种维生素,且有较强的药理作用,具有清凉去火论文网、平咳化痰、生津止咳、润喉醒酒和降低血糖等功效。与其他果实不同,常山胡柚的耐储存性较高,若不加任何处理,只需将果实堆放在室内较为阴凉处或挖土坑储藏,就可以保存至次年的4~5月[3]。因此,它在水果市场中深受广大群众欢迎,体现出了良好的经济效益。

近年来常山县加大了胡柚果园建设力度,常山胡柚的种植面积不断扩大;而且,相关方面也更加重视胡柚的产量及果实质量。但是,经几代繁殖后的胡柚果树,不易保存其母本的一些优良性状,所结果实味道不佳,因而果农常常采用扦插繁殖。但扦插育苗需时较长,繁殖速度太慢,不足以适应常山胡柚生产发展的需要。为了能够在更短的时间内,保质保量地进行胡柚良种繁殖,我们提出了采用组织培养的方式培育种苗的想法。

此次研究中使用最多的植物激素是6-BA,它是一种人工合成的细胞分裂素,在组织培养中可以诱导愈伤组织的形成。针对实验材料的种类不同及成熟程度不同,6-BA的最佳使用浓度也不一样,0.02~2.0 mg/L都有使用。这项研究以常山胡柚的幼茎、幼叶、幼芽和幼果等不同的器官为外植体进行组织培养,先诱导形成愈伤组织,然后在愈伤组织的基础上诱导分化出丛生芽,最终获得了常山胡柚的再生苗,此项研究旨在建立一个快速、高效、优质的常山胡柚种苗产业化生产体系。这既是果农的迫切需要,也是现今市场的需求。

1 材料与方法

1.1  实验材料

选择常山胡柚的幼茎、幼叶、幼芽和幼果等不同的器官作为外植体。具体为,将常山胡柚种植于实验大棚中,适时浇水保持其生长状况良好。在3月下旬胡柚的发芽期间,剪取获得胡柚幼茎、幼叶、幼芽。若为处于发芽期,胡柚无新芽,则可对胡柚进行打顶处理,经2周会长出新芽,经3~4周可获得适合实验的幼茎和幼叶。胡柚开花后3个月左右会结出幼果,选用直径大小在2~3 cm的幼果,剥出的幼胚,大小一般在1~3 mm,待用。文献综述

1.2  培养方法 

1.1.1 外植体消毒

用经无菌水稀释5倍的次氯酸钠溶液(含有效氯100~140 g/L)处理胡柚材料,幼叶片处理5~10 min,幼茎处理10~15 min,幼芽根据幼嫩程度处理2~5 min。然后用无菌水将处理后的材料清洗3~5次,用滤纸吸干表面多余的水分。胡柚幼果用洗洁精洗净浸泡5 min后,用蒸馏水冲洗干净,在超净台中,剥出幼胚,用稀释5倍的次氯酸钠溶液(含有效氯100~140 g/L)处理1~2 min,无菌水冲洗3~5次,用滤纸吸干表面多余的水分。根据果实的不同成熟程度,有时会剥出完整的种子。用稀释5倍的次氯酸钠溶液(含有效氯100~140 g/L)处理10 min,无菌水冲洗3~5次,用滤纸吸干表面多余的水分。

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