葛根素是一种异黄单体,亦称葛根黄素,是葛根的主要有效成分。葛根素具有多种药理作用,对肝组织免疫损害具有保护作用,可修复神经元和星型胶质细胞的损失,清除氧自由基,改善脑功能状态[1-3]。铅是柔软和延展性强的弱金属,有毒,也是重金属。长期接触铅,会破坏神经系统的结构并对学习和记忆功能带来不利影响,使患者认知和辨别能力降低[4-5]。而葛根素对于铅中毒造成的记忆障碍有否拮抗作用,还未见报导。我们此次主要是研究葛根素对小鼠记忆损伤的修复作用。
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验材料、试剂及配制
健康的昆明种小鼠:30只,由中国科学院上海实验中心提供,体重19-28g,清洁级;PbAC2:由南京建成生物工程研究所提供,用蒸馏水配制成30g/L浓度的溶液待用;葛根素:由南京泽朗医药科技有限公司生产。
2.1.2 实验仪器
鼠笼(3只)、1ml注射器、小鼠水迷宫、跳台、电子秤。
2.2 方法
2.2.1 动物分组
将小鼠分为3组,每组10只,雌雄各半。染毒组:在饲养过程中,24小时饮用2.5g/L浓度的PbAC2溶液,同时每天用与实验组等量的蒸馏水灌胃;实验组:在饮用2.5g/L浓度的PbAC2溶液同时,用2g/L剂量的葛根素灌胃;对照组:在饮用蒸馏水的同时,加注上述同样剂量的蒸馏水。各组动物正常进食,持续5周后,测定各组小鼠的学习能力及记忆能力。文献综述
2.2.2 水迷宫实验
迷宫是80×50×20cm3双层不透明有机玻璃箱,内设起始点、终点平台和四个盲端,平台附近为安全区,实验时迷宫水深10cm,水温25±1℃,迷宫周围一切空间标志在整个实验过程中固定不变,小鼠面向壁侧在中间隔板处放入水中,记录小鼠从放入水中开始到达终点平台所用的时间,连续测试三次,取其平均值作为学习成绩。当小鼠到达终点平台时,令小鼠在平台上休息30s,24h后再测,记录小鼠到达终点平台的时间,以此作为记忆成绩[6]。
2.3 统计学处理
数据用`X±S表示,采用DPS数据统计软件对数据进行统计学处理。
3 结果与分析
3.1 水迷宫实验结果
饮用PbAC2 5周后,对照组小鼠到达终点平台时间同染毒组无显著性差异(P>0.05)。实验组小鼠到达终点平台时间同染毒组相比有差异,但无显著性差异(P>0.05)。对照组的错误次数与染毒组相比无显著性差异(P>0.05),实验组的错误次数与染毒组相比有极显著差异(P<0.01),24h后,对照组小鼠到达终点平台时间同染毒组相比缩短,有显著性差异(P<0.05),实验组小鼠到达终点平台时间同染毒组相比有显著性差异(P<0.05),同时对照组,实验组的错误次数同染毒组相比有极显著性差异(P<0.01)。见表1:
各组小鼠水迷宫实验成绩(`X±S,n=10)
组别 学习成绩 记忆成绩
潜伏期 错误次数 潜伏期 错误次数
对照组 58.22±24.45 13.23±5.17 38.23±14.30a 9.21±2.16b