一、 前言

1.1 铁皮石斛的生物学特性及药理作用

铁皮石斛（Dendrobium officinale）为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）多年生的草本植物，主要生长于浙江、云南、广西、湖南、贵州等地，铁皮石斛是我国传统名贵中药材，具有滋阴清热、益胃生津、润肺明目、清咽利嗓、抗癌防老等功效，是2010 版《中华人民共和国药典》唯一单列收载[1]。铁皮石斛作为当前国内外研究的热门药用植物，具有较大的药用价值和较为广阔的市场开发前景。论文网

因为铁皮石斛特殊的生长环境和自身繁衍十分困难，再加上人们的过度采挖，目前铁皮石斛的野生资源已日趋减少，在1987年，铁皮石斛被列为国家重点保护的野生植物，在《中国植物红皮书》中被列为濒危种，现己成为国家二级保护植物。挽救和保护铁皮石斛野生种质资源并实现其可持续利用具有极其重要的意义。

为满足国内外市场经济发展和临床医学的需要，从20世纪70年代开始，国内科研工作者开始对铁皮石斛组织培养技术和人工栽培技术进行研究，20世纪80年代，浙江省医学科学院率先进行铁皮石斛组织培养的研究并取得突破性进展，使其得以运用于生产，从此，国内掀起了铁皮石斛的组织培养热，铁皮石斛的组织培养技术主要包括原球茎的诱导繁殖。

1.2 原球茎培养

短缩的、珠粒状的、类似幼茎的器官，是一种胚性细胞。从起源上讲,体细胞胚发生途径可能是兰科植物组织培养中原球茎产生的主要来源。张启香等[2]报道了铁皮石斛类原球茎的发生过程，认为原球茎是由位于顶端分生组织下的薄壁细胞脱分化形成的胚性细胞发育而来，茎尖作为外植体接种后，20d左右基部开始膨大，40d左右出现肉眼可见的乳白色突起，这些突起增大呈圆形即为原球茎。

在植物离体培养中，原球茎培养是植物器官培养的一个重要分支。在铁皮石斛的组织培养中，常用的外植体有种子、茎段、叶片、根等，在不同的培养条件下都可以诱导得出原球茎，这些原球茎可以进行增殖，待原球茎增殖到一定程度后，对其进行分割，使其形成新的原球茎，并进一步增殖分化得到铁皮石斛组培苗。铁皮石斛诱导形成的原球茎具备与野生植株相同的物质代谢能力以及形态发育的潜能，并且在药理作用上，铁皮石斛组织培养的原球茎与野生铁皮石斛植株对机体的作用相似，能提高机体的免疫能力，没有显著性差别。文献综述

1.3 铁皮石斛的化学成分

1.3.1多糖

多糖是石斛的主要化学成分之一，多糖成分与铁皮石斛的作用功效增强肌体免疫力、抗肿瘤、降血糖等方面有着紧密的联系，近年来的化学成分研究表明铁皮石斛多糖的含量是所有已分析的石斛属植物中最高种之一。

黄民权等[3]报道，野生铁皮石斛中多糖含量约为22.7%，固体培养铁皮石斛原球茎的含量在18.4%-17.7%之间，对铁皮石斛的多糖成分也进行了一定的研究，结果表明：铁皮石斛茎的上、中、下三部分总多糖和水溶性糖含量较高，它们的差异不大，以根部最低，只有茎部的13%左右。冷佳奕[4]研究了激素、培养方式与条件对铁皮石斛类原球茎有效成分影响，发现固体培养与液体培养均能提高铁皮石斛的多糖含量，但两者的差异不大。姚睿[5]对铁皮石斛原球茎和栽培植株茎叶中多糖和生物碱进行研究，发现多糖在原球茎中的分布量多于在植株的茎和叶片中，原球茎中的多糖主要存在于薄壁细胞内，茎中的多糖位于维管束周围，而叶片中的多糖主要分布于叶肉细胞内。

1.3.2生物碱